Protein expression and purification · 2004
Production and purification of Bacillus anthracis protective antigen from Escherichia coli.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Laird Michael W, Zukauskas David, Johnson Kelly, Sampey Gavin C, Olsen Henrik, Garcia Andy, Karwoski Jeffrey D, Cooksey Bridget A, Choi Gil H, Askins Janine, Tsai Amos, Pierre Jennifer, Gwinn William
Аннотация
Anthrax is caused by the gram-positive, spore-forming bacterium, Bacillus anthracis. The anthrax toxin consists of three proteins, protective antigen (PA), lethal factor, and edema factor. Current vaccines against anthrax use PA as their primary component since it confers protective immunity. In this work, we expressed soluble, recombinant PA in relatively high amounts in the periplasm of E. coli from shake flasks and bioreactors. The PA protein was purified using Q-Sepharose-HP and hydroxyapatite chromatography, and routinely found to be 96-98% pure. Yields of purified PA varied depending on the method of production; however, medium cell density fermentations resulted in approximately 370 mg/L of highly pure biologically active PA protein. These results exhibit the ability to generate gram quantities of PA from E. coli.