Изоляция и цитометрическая оценка взаимодействия нейроиммунов в модели Mini-Stroke Murine.

Строке является одной из основных причин смерти и долгосрочной инвалидности во всем мире, причем большинство случаев приходится на ишемический инсульт. После ишемического инсульта активируются постоянные и проникающие иммунные клетки, что ведет к новым нейронным повреждениям. Однако роль иммунной системы в патологии ишемического инсульта не в полной мере понятна, главным образом из-за сложного и динамичного регулирования иммунной реакции в реакции на изменения в микроокружающей среде во время нейроинфламмации. Поэтому крайне важно контролировать и анализировать активацию постоянных и проникающих иммунных клеток с течением времени после ишемического инсульта. В этом исследовании мы представляем протокол для оценки функции этих иммунных клеток после ишемического инсульта с использованием цитометрического анализа потока в мини-тактной модели. Мы микродискрутим инфракрасную ткань мозга в определенные моменты времени, а затем разделим ее на одноклеточную суспензию с использованием как механических, так и энзиматических методов. Клетки проходят через штаммер из 70 мкм клеток и маркируются флуоресцентно маркированными антителными коктейлями, а затем получают количественную оценку с помощью цитометрического анализа потока. Хотя этот анализ был разработан специально для изучения нейроиммунных взаимодействия после ишемического инсульта, его также можно легко адаптировать к изучению нейроиммунных механизмов других нейродегенеративных заболеваний, таких, как множественный склероз, болезнь Паркинсона и болезнь Альцгеймера.