От клеточных отходов до биомаркеров; осмысление прошлых, нынешних и будущих методов обнаружения экстраклетных везикс, созданных иммунными клетками, с использованием цитометрии потока.

Внешнеклеточные везикли (ЭМ) часто обладают как повсеместной, так и уникальной тетраспанинской молекулами, которые могут помочь пролить свет на их клетку происхождения. Кроме того, наличие и/или отсутствие конкретных тетраспанинов может использоваться для фенотипирования и выявления конкретных подгрупп ЭМ. В контексте связанных с иммунным иммунитетом нарушений (т.е. множественный склероз, ревматоидный артрит и различные раковые заболевания) в настоящее время изучаются конкретные ЭМ, полученные с помощью иммунных клеток, в контексте биомаркетных исследований, выявления новых механизмов борьбы с заболеваниями и мониторинга терапевтических мер реагирования у пациентов. Цитометрия потока (FCM) - это метод, в рамках которого используются светодиодные свойства клеток и/или подклеточных частиц (например. ЭМ), сочетая флуоресцентные сигналы, которые могут обнаруживать присутствие, отсутствие или изобилие поверхностных и/или внутриклеточных молекул. Однако на сегодняшний день использование УФМ для точной количественной оценки популяций ЭМ сопряжено с трудностями из-за их относительно небольших размеров и слабых свойств рассеивания света и флуоресцирующих свойств по сравнению с нетронутыми клетками. Исторически применение калибровочных бортов известных размеров, рефракторных индексов, разброса фиолетовых материалов и стандартизированных методологий вносит позитивный вклад в точное обнаружение и количественную оценку ЭМ, позволяя также проводить разведку их биологических свойств. Этот обзор содержит резюме и обзор существующих методологий ФХМ, которые используются для оценки ЭМ, производимых иммунными клетками, в рамках биологических жидкостей и супернатантов клеток. Признавая прошлые и нынешние ограничения, а также достигнутые в последнее время успехи, усовершенствования и эффективность оценок, используемых в исследованиях, связанных с ЭМ, эта область будет неизбежно продолжать развиваться за счет применения стандартов и руководящих принципов в целях расширения возможностей обнаружения и воспроизводимости.