Analytical biochemistry · 1993
Lactate oxidation for the detection of mitochondrial dysfunction in human skin fibroblasts.
Сравнительное исследованиеСтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Ofenstein J P, Kiechle F L, Dandurand D M, Belknap W M, Moore K H, Holmes R D
Аннотация
To screen fibroblasts for defects in lactate/pyruvate oxidation, cells were grown to confluence in 25-cm2 flasks, rinsed, and incubated in glucose-free media containing 25 microM L-lactate and 0.1 microCi [D,L-1-14C]lactate. Lactate oxidation was measured as the amount of lactate oxidized in nmol of 14CO2 generated/mg protein/min. Fibroblasts from patients with mitochondrial or peroxisomal disorders had decreased lactate oxidation compared to the control (CON): CON, 1.9 +/- 0.13 nmol/mg/min; neonatal adrenoleukodystrophy (NALD), 0.45 +/- 0.01 (P < 0.001); rhizomelic chondrodysplasia punctata (RCDP), 0.13 +/- 0.002 (P < 0.001); mitochondrial defect of unknown etiology (MIT), 0.77 +/- 0.003 (P < 0.001); pyruvate dehydrogenase (PDH) deficiency, 0.98 +/- 0.02 (P < 0.001). This method is useful for screening fibroblasts for defects in lactate oxidation in patients with mitochondrial or peroxisomal disorders. Confirmation of the site of the defect may then be investigated with specific assays, e.g., PDH, in cellular homogenates: CON, 0.93 +/- 0.02 nmol/mg/min; NALD, 0.55 +/- 0.02; RCDP, 0.44 +/- 0.02; MIT, 0.53 +/- 0.03; PDH deficiency, 0.19 +/- 0.02.