MedElevator
Войти в исследования DOI 10.3389/fcimb.2024.1477422
ЭОД-КРИСПР/КАС12а, быстрое и конкретное диагностическое обнаружение пневмонии хламидии.
Аннотация
Хламидиозная пневмония (К. пневмония) — специализированный внутриклеточный паразитический патоген, способный вызывать пневмонию, синусет, бронхит и другие респираторные заболевания, которые создают серьезные проблемы для здоровья населения. Поэтому быстрый, точный и чувствительный диагноз имеет решающее значение для профилактики и лечения респираторных заболеваний, вызванных пневмонией. В этом исследовании мы комбинировали энзимическую рекомбинацию (ERA) с соединенными регулярно межпространственными короткими палиндромными повторами (CRISPR)/CRISPR-связанными с белком (Cas) 12a системой (CRISPR/Cas12a) для разработки двойной платформы обнаружения, именуемой Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a двойной системой. Эта система объединяет как систему ЭРА - КРИСПР/КАС12а - флуоресцентную систему, так и систему ЭРА - КРИСПР/КАС12а с боковым расходом потока. Результаты обнаружения могут измеряться с помощью флуоресцентного детектора или с помощью невооруженного глаза на боковых полосах потока. Система флуоресцирования и система бокового потока обнаруживают С. пневмонию соответственно за 30 и 15 минут. Эта двойная система не имеет перекрестной реактивности с другими семью патогенами, демонстрируя высокую специфичность, и достигает чувствительности в 100 экземпляров/мл. Кроме того, для анализа 39 клинических образцов была использована двойная система Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a, состоящая из 19 положительных и 20 негативных образцов. Коэффициент обнаружения положительных проб составлял 100%, при этом положительные результаты в отрицательных пробах отсутствовали, что свидетельствует о высокой степени соответствия с результатами qPCR. Короче говоря, двойная система Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a представляет собой новый инструмент диагностики C. пневмонии и обладает перспективным потенциалом применения в общинных больницах низового уровня.
Название и аннотация на языке оригинала
ERA-CRISPR/Cas12a-based, fast and specific diagnostic detection for Chlamydia pneumoniae.
Chlamydia pneumoniae (C. pneumoniae) is a specialized intracellular parasitic pathogen capable of causing pneumonia, sinusitis, bronchitis, and other respiratory diseases, which pose significant public health challenges. Therefore, rapid, accurate, and sensitive diagnosis is crucial for the prevention and treatment of respiratory diseases caused by C. pneumoniae. In this study, we combined enzymatic recombination amplification (ERA) with the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated protein (Cas) 12a system (CRISPR/Cas12a) to develop a dual detection platform termed the Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a dual system. This system integrates both the ERA-CRISPR/Cas12a fluorescence system and the ERA-CRISPR/Cas12a lateral flow system. Detection results can be measured using a fluorescence detector or observed with the naked eye on lateral flow strips. The fluorescence system and the lateral flow system detect C. pneumoniae in 30 minutes and 15 minutes, respectively. This dual system exhibits no cross-reactivity with the other seven pathogens, demonstrating high specificity, and achieves a sensitivity of 100 copies/µL. Additionally, the Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a dual system was employed to analyze 39 clinical samples, comprising 19 positive and 20 negative samples. The detection rate for positive samples was 100%, with no positive results in the negative samples, indicating a high level of concordance with qPCR results. In summary, the Cpn-ERA-CRISPR/Cas12a dual system represents a novel tool for diagnosing C. pneumoniae and holds promising application potential in grassroots community hospitals.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.