Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) · 2023
CRISPR-FISH: A CRISPR/Cas9-Based In Situ Labeling Method.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Potlapalli Bhanu Prakash, Ishii Takayoshi, Nagaki Kiyotaka, Somasundaram Saravanakumar, Houben Andreas
Аннотация
Fluorescence in situ hybridization (FISH) has been widely used to visualize target DNA sequences in fixed chromosome samples by denaturing the dsDNA to allow complementary probe hybridization, thus damaging the chromatin structure by harsh treatments. To overcome this limitation, a CRISPR/Cas9-based in situ labeling method was developed, termed CRISPR-FISH. This method is also known as RNA-guided endonuclease-in situ labeling (RGEN-ISL). Here we present different protocols for the application of CRISPR-FISH on acetic acid: ethanol or formaldehyde-fixed nuclei and chromosomes as well as tissue sections for labeling repetitive sequences in a range of plant species. In addition, methods on how immunostaining can be combined with CRISPR-FISH are provided.