MedElevator
Войти в исследования Изоляция цецугамуши в культуре из Веллоре, Южная Индия.
Аннотация
Фон: Orientia tsutsugamushi, причинно-следственный агент скруба тифа — внутриклеточный паразит. Мы представляем информацию об изоляции этого патогена в центре третичного ухода в Веллоре, Южная Индия.
Материалы и методы
PBMC (периферальные моноядерные клетки крови), собранные у предполагаемых пациентов скруба тифа, были привиты в линии Vero и L929 клеток и инкубированы при 37°C с 5% СО2 в течение 30 дней. Они были обследованы на предмет присутствия "Ористиа цуцугамуши" 10, 15, 20 дней после интоксикации и ежедневно в течение максимум 30 дней после вакцинации. Скраски были подвергнуты пятнам Giemsa, IFA, 47kDa qPCR и электронной микроскопии (TEM). Изоляции проходили 3-4 раза, чтобы обеспечить жизнеспособность, а затем хранились в DMEM с 10% FBS (-80). Genotyping of the изоленты были выполнены путем увеличения 650 bp сегмента гена TSA 56 (тип конкретного антигена 56).
Результаты
Из 50 прививок три были положительными, что было подтверждено 47 кДа qPCR на 24-й день после прививки. Это было также подтверждено " Джимса " , " ИФА " и " ТЕА " . 650-битровые ампликоны показали 99,5-100-процентную гомологию с штаммами Orientia tsutsugamushi MW604716, MH003839, MW604718, MW604717, MH922787 и MH003838. Филиогенетический анализ показал, что 2 изолирующего вещества принадлежат к генотипу TA763, а один - генотипу Гиллиама. Вывод: < < Ориентия цуцугамуши > > была впервые изолирована в Веллоре, Южная Индия, от ПБМК. Полный геномный анализ позволит получить дополнительную информацию.
Название и аннотация на языке оригинала
Isolation of Orientia tsutsugamushi in Culture from Vellore, South India.
Background
Orientia tsutsugamushi, causative agent of scrub typhus is an obligate intracellular parasite. We present information on isolation of this pathogen at a tertiary care centre in Vellore, Southern India. Materials &
Methods
PBMCs (peripheral blood mononuclear cells) collected from suspected scrub typhus patients were inoculated into Vero and L929 cell lines and incubated at 37°C with 5% CO2 for 30 days. They were examined for presence of Orientia tsutsugamushi on 10, 15, 20 days post-inoculation and everyday thereafter for a maximum of 30 days post inoculation. The scrapings were subjected to Giemsa staining, IFA, 47kDa qPCR and transmission electron microscopy (TEM). The isolates were passaged 3-4 times to ensure viability and then stored in DMEM with 10% FBS (-80). Genotyping of the isolates was performed by amplifying a 650 bp segment of the TSA 56 (type specific antigen 56) gene.
Results
Amongst the 50 samples inoculated, three were culture positive as confirmed by 47 kDa qPCR on 24th day post inoculation. This was further confirmed by Giemsa, IFA staining and TEM. The 650bp amplicons showed 99.5 to 100% homology with Orientia tsutsugamushi MW604716, MH003839, MW604718, MW604717, MH922787 and MH003838 strains. Phylogenetic analysis revealed that 2 isolates belong to TA763 genotype and one belongs to Gilliam genotype.
Conclusion
Orientia tsutsugamushi has been isolated for the first time at Vellore, South India from PBMCs. Complete genomic analysis will give more information.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.