Communications biology · 2023
Split luciferase-based assay to detect botulinum neurotoxins using hiPSC-derived motor neurons.
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cotter Laurent, Yu Feifan, Roqueviere Sylvain, Duchesne de Lamotte Juliette, Krupp Johannes, Dong Min, Nicoleau Camille
Аннотация
Botulinum neurotoxins (BoNTs) have been widely used clinically as a muscle relaxant. These toxins target motor neurons and cleave proteins essential for neurotransmitter release like Synaptosomal-associated protein of 25 kDa (SNAP-25). In vitro assays for BoNT testing using rodent cells or immortalized cell lines showed limitations in accuracy and physiological relevance. Here, we report a cell-based assay for detecting SNAP-25-cleaving BoNTs by combining human induced Pluripotent Stem Cells (hiPSC)-derived motor neurons and a luminescent detection system based on split NanoLuc luciferase. This assay is convenient, rapid, free-of-specialized antibodies, with a detection sensitivity of femtomolar concentrations of toxin, and can be used to study the different steps of BoNT intoxication.