Оценка устойчивости лиофилированных изотермальных реагентов для амплификации с целью обнаружения ожогов " Coxiella " .

Coxiella signetii — патоген, вызывающий патоген Q лихорадки, — является обязательным внутриклеточным бактерием и относится к категории агентов уровня 3 по биобезопасности. Обнаружение и количественное определение бактерий с использованием традиционных методов культивации занимает много времени и сопряжено с серьезными рисками для здоровья. Для обнаружения C. signetii были разработаны цепные анализы на основе полимеразы (ПКР) и могут обеспечить быструю диагностику. Однако им требуется специальное оборудование, включая холодильную цепочку для реагентов ПХВ, которая обеспечивает их устойчивость во время хранения и транспортировки. Эти требования ограничивают преимущества методов ПЦР, особенно в районах с ограниченными ресурсами. Ранее мы разработали изотермальную амплификацию (LAMP) для выявления присутствия C. signetii. Чтобы упростить и усовершенствовать этот анализ, реагенты для анализа LAMP и обнаруженный реагент SYBR зеленый были вместе лиофилированы. Стабильность лиофиловых реагентов оценивалась путем измерения изменений в пределе обнаружения для плазмидной ДНК, кодирующей ген C. signetii при хранении при 4°C, 25°C или 37°C. Наши данные показывают, что лиофильные реагенты остаются стабильными в течение 24 месяцев, когда они хранятся при температуре 4 °C, 28 дней при температуре 25 °C и 2 дней при температуре 37 °C. Этот усовершенствованный анализ LAMP может быть легко выполнен в простой водяной ванне или нагревательном блоке. Стабильность при температуре окружающей среды, простота процедуры анализа и наличие недорогого оборудования делают этот метод идеальным для использования в ограниченных ресурсами условиях, когда Q лихорадка эндемична.