MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1016/j.mimet.2013.11.010
Переходы в развитие Коксиеллы, выращенные в токсических средах.
Аннотация
Коксиелла ожоги ii проходит в своей принимающей клетке двухфазный цикл развития, в результате которого образуются морфологически и физиологически различимые большие варианты клеток (LCV) и небольшие клеточные варианты (SCV). На этапе отставания цикла роста C. signetii, не воспроизводящий CCV, проводится различие между воспроизведением LCV, который, в свою очередь, проводит различие между SCV на стационарной фазе. Почти однородный КЦВ наблюдается в инфицированных верокачественных клетках после удлинения инкубации (21-28 дней). В ходе нынешнего исследования мы попытались определить, являются ли изменения в развитии C. signetii в принимающих ячеках перекличками в период роста без клеток (аксеников) в подкисленной цитейной среде первого и второго поколения (ACCM-1 и ACCM-2, соответственно). Мы показываем, что ACCM-2 поддерживал переходы к развитию и жизнеспособность. Несмотря на то, что ACCM-1 также оказывал поддержку в переходе от СКВ к LCV, переход от ЛКВ к SSV не происходил после продления инкубации (21 день). Вместо этого, C. signetii проявляла призрачный внешний вид с бактериями, содержащими конденсированный хроматин, но не имеющими цитоплазмического содержания. Этот фенотип коррелировал с почти полной утратой жизнеспособности в период между 14 и 21 днями культивирования. Переписное профилирование C. signetii после 14 дней инкубации выявило повышенное выражение генов окислительного стресса в культивируемых бактериях ACCM-1. ACCM-2 отличается от ACCM-1 за счет замены сыворотки говядины метил-β-циклодекстрина (Mβ-CD) на говядину плода. Добавление Mβ-CD в ACCM-1 в течение 7 дней после инокуляции спасло жизнеспособность C. signetii и уменьшило выражение генов окислительного стресса. Таким образом, Mβ-CD, как представляется, уменьшает окислительный стресс в ACCM-2, что приводит к изменениям в развитии C. sergetii и жизнеспособности, которые имитируют организмы, рекультивированные носителями клеток. Аксенское культивирование C. sergetii в ACCM-2 и новые методы генетической манипулирования в настоящее время позволяют изучить молекулярную основу развития C. signetii.
Название и аннотация на языке оригинала
Developmental transitions of Coxiella burnetii grown in axenic media.
Coxiella burnetii undergoes a biphasic developmental cycle within its host cell that generates morphologically and physiologically distinct large cell variants (LCV) and small cell variants (SCV). During the lag phase of the C. burnetii growth cycle, non-replicating SCV differentiate into replicating LCV that in turn differentiate back into SCV during stationary phase. Nearly homogeneous SCV are observed in infected Vero cells after extended incubation (21 to 28days). In the current study, we sought to establish whether C. burnetii developmental transitions in host cells are recapitulated during host cell-free (axenic) growth in first and second generation acidified citrate cysteine media (ACCM-1 and ACCM-2, respectively). We show that ACCM-2 supported developmental transitions and viability. Although ACCM-1 also supported SCV to LCV transition, LCV to SCV transition did not occur after extended incubation (21days). Instead, C. burnetii exhibited a ghost-like appearance with bacteria containing condensed chromatin but otherwise devoid of cytoplasmic content. This phenotype correlated with a near total loss in viability between 14 and 21days of cultivation. Transcriptional profiling of C. burnetii following 14days of incubation revealed elevated expression of oxidative stress genes in ACCM-1 cultivated bacteria. ACCM-2 differs from ACCM-1 by the substitution of methyl-β-cyclodextrin (Mβ-CD) for fetal bovine serum. Addition of Mβ-CD to ACCM-1 at 7days post-inoculation rescued C. burnetii viability and lowered expression of oxidative stress genes. Thus, Mβ-CD appears to alleviate oxidative stress in ACCM-2 to result in C. burnetii developmental transitions and viability that mimic host cell-cultivated organisms. Axenic cultivation of C. burnetii in ACCM-2 and new methods of genetic manipulation now allow investigation of the molecular basis of C. burnetii biphasic development.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.