Полиовирусные, нокаутные клетки CD155 получены из линии клеток RD для обработки полиомиелитвирусных потенциально инфекционных материалов в вирологических лабораториях.
Аннотация
Уничтожение всех полиомиелитвирусов, содержащих материалы, безопасное и надежное обращение с сохраняющимися полиомиелитвирусами для производства вакцин, и проведение исследований будет обязательным для устранения рисков, связанных с объектами. В документах Всемирной организации здравоохранения - Глобального плана действий (ГПД III) определены полиовирузы и полиомиелитвирусные потенциально инфекционные материалы (МНИ), включая пробы фекалий или органов дыхания, требующие сдерживания. Неполио-лаборатории, производящие вирусы из ПИМ, в наибольшей степени страдают от этого заболевания, поскольку культуры клеток человеческого происхождения и обезьян также допускают полиомиелитвирус. Для вырубки рецептора полиомиелитвируса (PVR/CD155) в клеточной линии rabdomyosarcoma (RD) использовалась технология генной коррекции CRISPR. PVR-нокаутная уязвимость клеток RD была испытана с использованием известных типов неполиоэнтеровируса (NPEV). Отобранный клон (RD-SJ40) был оценен на предмет защиты от вируса из 626 образцов стула от острого легкого паралича. Полиовирусные неопознанные клетки, полученные из линии ячеек RD, не продемонстрировали иммунофлюоресценцию по отношению к клеточной поверхности CD155. CD155 секвенирование генов подтвердило исключение пар оснований нуклеотида в рамках экзона2 и экзона3. Клетки CD155 с нокаутом RD-SJ40 не поддерживали рост полиомиелитвируса из положительных образцов стула. Все типы NPEV были изолированы в камерах RD и RD-SJ40.CRISPR правильно отредактировал ген CD155 клеток RD, чтобы сделать их полиомиелитвирусными, в то время как подверженность NPEV осталась неизменной. Клетки RD-SJ40 безопасны для изоляции NPEV от полиомиелитвирусного ПИМ без отступления от требований GAP III.
Название и аннотация на языке оригинала
Poliovirus nonpermissive CD155 knockout cells derived from RD cell line for handling poliovirus potentially infectious materials in virology laboratories.
Destruction of all poliovirus containing materials, safe and secure handling of retained polioviruses for vaccine production, and research will be obligatory to eliminate facility-associated risks. Polioviruses and poliovirus potentially infectious materials (PIM) including fecal or respiratory samples requiring containment have been defined in World Health Organization-Global Action Plan (GAP III) documents. Non-polio laboratories culturing viruses from PIM are most affected as cell cultures of human and monkey origin are also poliovirus permissive. CRISPR gene-editing technology was used to knockout the poliovirus receptor (PVR/CD155) gene in the rhabdomyosarcoma (RD) cell line. PVR knockout RD cell susceptibility was tested using known non-polio enterovirus (NPEV) types. A selected clone (RD-SJ40) was field evaluated for virus isolation from 626 stool samples of acute flaccid paralysis cases. Poliovirus nonpermissive cells derived from the RD cell line did not show CD155-specific cell-surface immunofluorescence. CD155 gene sequencing confirmed nucleotide base pair deletions within exon2 and exon3. The CD155 knockout RD-SJ40 cells did not support the growth of poliovirus from positive stool samples. All NPEV types were isolated in RD and RD-SJ40 cells. CRISPR correctly edited the CD155 gene of RD cells to render them poliovirus nonpermissive while susceptibility to NPEV remained unchanged. RD-SJ40 cells are safe for NPEV isolation from poliovirus PIM without derogating GAP III containment requirements.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.