К дальнейшему сокращению и замене биомассы животных в исследованиях прионов с помощью клеток и белков, искажающих циклические амплификации.
Аннотация
Лабораторные животные уже давно широко используются в биомассах прионов для количественной оценки, как правило, с точки зрения средних доз инфекции [ID50], насколько инфекционные эти патогены заразны в vivo. Идентификация аберрантного прионного белка в качестве основного компонента и самовоспроизводящегося принципа прионов привела к появлению альтернативных подходов к прионному титрации. В таких подходах часто используются белки, искажающие циклическую амплификацию (PMCA) для неклеточного биохимического измерения связанной с прионами деятельности по посевам, или анализы клеток на предмет титрации инфекционной инфекции in vitro. Однако средние дозы посева и клеточной культуры (SD50 и CCID50, соответственно) прионов не являются ни формально совпадающими, ни явно репрезентативными для ID50 титр у животных, и поэтому их можно перевести лишь в предварительном порядке. Это потенциально может препятствовать принятию и использованию альтернативных методов биомассирования животных в исследованиях прионов. Таким образом, мы предлагаем проводить анализы PMCA и клеток совместно, а также проверить, дают ли эти глубоко отличающиеся друг от друга принципы испытаний последовательные результаты, с тем чтобы повысить надежность и достоверность оценок ID50 с помощью методов in vitro. Что касается этого обоснования, то мы описываем три пары PMCA и глиальных клеток для различных приспособленных к хомякам прионовых агентов (часто используемый 263K штамм скрипки и 22A-H скрипки и BSE-H). Кроме того, мы представляем информацию об адаптации количественных значений PMCA к человеческому варианту болезни Креуцфельдт-Якоб (vCJD) на стальных проводах для проведения исследований в области дезинфекции прионов. Наше обоснование и методология могут систематически распространяться на другие виды прионов и использоваться для дальнейшего сокращения или замены прионовых биомасс у грызунов.
Название и аннотация на языке оригинала
Towards further reduction and replacement of animal bioassays in prion research by cell and protein misfolding cyclic amplification assays.
Laboratory animals have long since been used extensively in bioassays for prions in order to quantify, usually in terms of median infective doses [ID50], how infectious these pathogens are in vivo. The identification of aberrant prion protein as the main component and self-replicating principle of prions has given rise to alternative approaches for prion titration. Such approaches often use protein misfolding cyclic amplification (PMCA) for the cell-free biochemical measurement of prion-associated seeding activity, or cell assays for the titration of in vitro infectivity. However, median seeding and cell culture infective doses (SD50 and CCID50, respectively) of prions are neither formally congruent nor definitely representative for ID50 titres in animals and can be therefore only tentatively translated into the latter. This may potentially impede the acceptance and use of alternative methods to animal bioassays in prion research. Thus, we suggest performing PMCA and cell assays jointly, and to check whether these profoundly different test principles deliver consistent results in order to strengthen the reliability and credibility of prion ID50 assessments by in vitro methods. With regard to this rationale, we describe three pairs of PMCA and glial cell assays for different hamster-adapted prion agents (the frequently used 263K scrapie strain, and 22A-H scrapie and BSE-H). In addition, we report on the adaptation of quantitative PMCA to human variant Creutzfeldt-Jakob disease (vCJD) prions on steel wires for prion disinfection studies. Our rationale and methodology can be systematically extended to other types of prions and used to further reduce or replace prion bioassays in rodents.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.