Высокочувствительный количественный анализ на основе клеток прионов, поглощаемых твердыми поверхностями.
Аннотация
Прины состоят главным образом из агрегатов неправильно завязанного белка и вызывают смертельные трансмиссивные нейродегенеративные расстройства у людей и животных, такие как болезнь Креуцфельда-Якоба и энцефалопатия говядины. Прины вызывают серьезную озабоченность в плане здоровья населения, включая загрязнение продуктов крови и хирургических инструментов; требуют трудоемкого и зачастую бесчувственного биомассирования животных для обнаружения; и сопротивляются традиционным методам стерилизации в больницах. Крупным экспериментальным прогрессом стало исследование клеток клеточной клетки на основе скрипки, позволившее оценивать прионные титры более точно и на порядок величины быстрее, чем биомассы животных. Здесь мы описываем биореспираторный метод, который использует ярко выраженную связь прионов с стальными поверхностями. Использование стальных проводов в качестве инструмента концентрации и сенсибилизации и комбинирование с адаптированной точкой конечных точек скрипчатых клеток мы можем достичь, для прионов мыши, чувствительности на 100x больше, чем в стандартных биомассах мыши. Быстрость и чувствительность этого анализа позволяют значительно продвинуться вперед по сравнению с биомассой мелких животных во многих аспектах исследований приона. Кроме того, конкретное применение прионов металлического типа позволяет оценить новые методы обеззараживания прионов.
Название и аннотация на языке оригинала
Highly sensitive, quantitative cell-based assay for prions adsorbed to solid surfaces.
Prions are comprised principally of aggregates of a misfolded host protein and cause fatal transmissible neurodegenerative disorders of humans and animals, such as variant Creutzfeldt-Jakob disease and bovine spongiform encephalopathy. Prions pose significant public health concerns, including contamination of blood products and surgical instruments; require laborious and often insensitive animal bioassay to detect; and resist conventional hospital sterilization methods. A major experimental advance was the cell culture-based scrapie cell assay, allowing prion titres to be estimated more precisely and an order of magnitude faster than by animal bioassays. Here we describe a bioassay method that exploits the marked binding affinity of prions to steel surfaces. Using steel wires as a concentrating and sensitization tool and combining with an adapted scrapie cell endpoint assay we can achieve, for mouse prions, a sensitivity 100x higher than that achieved in standard mouse bioassays. The rapidity and sensitivity of this assay offers a major advance over small animal bioassay in many aspects of prion research. In addition, its specific application in assay of metal-bound prions allows evaluation of novel prion decontamination methods.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.