MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1016/j.neuint.2006.07.006
Повышение иммуноактивности с хелаторами в целях повышения чувствительности к обнаружению человека prPSc за счет западного пятна.
Аннотация
Прионские заболевания представляют собой нейродегенеративные расстройства, затрагивающие людей, как болезнь Креуцфельдта-Якоба. Закодированный белок приона (PRP(C)) будет преобразован в структурно изоформу (PRP(Sc)). PrP(Sc) различаются по размерам и гликоформам и могут быть идентифицированы с помощью молекулярного печатания с западной пятнистостью. Электрофоретическая мобильность ПР(Sc) изменяется при обработке металлическими ионами или хелаторами до пищеварения выступами. В ходе этого исследования мы изучили последствия применения хелаторов к пр(Sc) после того, как переваривание протеза не было подробно изучено. Применение EGTA, NTA и DTPA, и в меньшей степени EGTA, значительно повысило уровень сигналов prP(Sc) в иммунобротах. По сравнению с неочищенным ППС(Сс) интенсивность ППС(Пс) возросла в два-три раза. Поскольку иммунобитный метод весьма специфичен, фактор чувствительности является ограничивающим фактором. Повышение чувствительности может иметь важное значение для определения prP(Sc) на уровнях, близких или чуть ниже пределов обнаружения. Следует ожидать, что применение хелаторов к перевариваемым образцам белка повысит чувствительность обнаружения prP(Sc) с использованием западной технологии пятна.
Название и аннотация на языке оригинала
Immunoreactivity enhancement with chelators for increasing the detection sensitivity of human PrPSc by Western blotting.
Prion diseases are neurodegenerative disorders affecting humans as Creutzfeldt-Jakob disease. The host-encoded prion protein (PrP(C)) will be converted into a structurally altered isoform (PrP(Sc)). PrP(Sc) differ in sizes and glycoform patterns and can be identified using molecular typing with Western blotting. The electrophoretic mobility of PrP(Sc) changes on treatment with metal ions or chelators prior to digestion with proteases. The effects of chelators applied to PrP(Sc) after protease digestion had not been examined in detail, we investigated these effects in this study. Application of EDTA, NTA and DTPA, and to a lesser extent EGTA, significantly enhanced PrP(Sc) signals in immunoblots. PrP(Sc) intensities increased two- to three-fold compared with untreated PrP(Sc). Since the immunoblot method is highly specific, sensitivity is the limiting factor. Enhancing sensitivity might be important in the determination of PrP(Sc) at levels close to or just below the limits of detection. It is to be expected that application of chelators to digested protein samples will increase the sensitivity of PrP(Sc) detection using the Western blot technique.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.