Анализ репродукции ДНК вируса JC с использованием количественной и высокопроизводительной оценки.

Прогрессивная многофукальная лейкоэнцефалопатия (ПМЛ) вызвана литическим воспроизведением вируса JC (JCV) в конкретных клетках центральной нервной системы. Как и другие полиомавирузы, JCV кодирует большой Т-антигенный вертолет, необходимый для воспроизведения вирусной ДНК. Здесь мы сообщаем о разработке люсиферазы, количественного и высокопроизводительного анализа копирования ДНК JCV в клетках C33A, которые, в отличие от глиальных клеточных линий Hs 683 и U87, накапливают высокие уровни ядерных T-ag, необходимых для надежного воспроизведения. Используя этот анализ, мы изучили требования для различных областей T-ag, а также для конкретных последовательностей внутри и в фланге вирусного происхождения в JCV ДНК репликации. Помимо подтверждения результатов анализа, эти исследования выявили важную стимулирующую роль коэффициента транскрипции NF1 при копировании ДНК JCV. Наконец, мы показываем, что результаты анализа могут быть использованы для анализа ингибиторов, что подчеркивает его ценность для идентификации антивирусных препаратов, предназначенных для копирования ДНК JCV.