MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1016/j.jviromet.2024.115044
Анализ антигенных и иммуногенных свойств местного бешеного вируса гликпротеина, очищенного Lens culinaris lectin affinity хроматография.
Аннотация
Гликопротеин вируса Рабиес (RABV-G) отвечает за распознавание конкретных рецепторов поверхности клеток и стимулирует производство нейтрализации антител (VNA). Поскольку RABV-G является гликпротеином, эта работа была направлена на оценку хроматографии Ленса кулинариса (LCA) в качестве простого и эффективного метода очистки. Чистота и идентификация полученного белка были проанализированы с помощью ПБ-ПАГЕ, ЭЛИСА и лектиновых связующих аналитиков. Антигенные свойства очищенных RABV-G оценивались с помощью прямых ЭЛИСА с использованием образцов сыворотки человека, полученных от лиц, прошедших вакцинацию от бешенства до заражения. Для исследования иммуногенности мыши швейцарского Webster были иммунизированы очищенными RABV-G, а конкретные антитела измерялись с помощью прямых ЭЛИСА и RFFIT. В результате было замечено, что очищенный протеин покрывал молекулярную массу 55 кДа и наличие углевода; кроме того, он был признан вирусом против бешенства гликопротеиновым моноклональным антителом. Очищенные VNA Titters (>50,0 IU/ml) в vivo, обнаруженные RFFIT, а также RABV-G специфический IgG1 (0,8 означает OD_SD) и IgG2a (0,3 - OD_SD) антитела с преобладанием IgG1 (p<0,001). Кроме того, было отмечено, что < < RABV-G > > является эффективным средством выборочного обнаружения противо RABV-G IgG в сере вакцинированных лиц по сравнению с негативным контролем. Таким образом, хроматография АЖЦ была эффективной с точки зрения сохранения местных свойств РАБВ-Г, которые имеют существенно важное значение для стимулирования адекватной юморальной иммунной реакции. Кроме того, очищенный RABV-G представил аналитический потенциал в качестве реагента ELISA.
Название и аннотация на языке оригинала
Analysis of the antigenic and immunogenic properties of the native rabies virus glycoprotein purified by Lens culinaris lectin affinity chromatography.
Rabies virus glycoprotein (RABV-G) is responsible for the recognition of specific cell surface receptors and induces the production of neutralizing antibodies (VNA). Since RABV-G is a glycoprotein, this work aimed to evaluate Lens culinaris (LCA) chromatography as a simple and effective purification method. The purity and identification of the protein obtained were analyzed by SDS-PAGE, ELISA and lectin-binding assay. The antigenic properties of the purified RABV-G were evaluated by direct ELISA using human serum samples from individuals who had received rabies pre-exposure vaccination. For the immunogenicity study, Swiss Webster mice were immunized with purified RABV-G and the specific antibodies were measured by direct ELISA and RFFIT. As results, it was observed that the purified protein reveled a molecular mass of 55 kDa and the presence of carbohydrate; additionally, it was recognized by anti-rabies virus glycoprotein monoclonal antibody. Purified RABV-G induced high VNA titers (>50.0 IU/ml) in vivo, as detected by RFFIT, as well as RABV-G specific IgG1 (0.8 mean OD±SD) and IgG2a (0.3 mean OD±SD) antibodies, with a predominance of IgG1 (p< 0.001). In addition, it was observed that RABV-G was efficient in selectively detecting anti- RABV-G IgG in the sera of vaccinated individuals compared to the negative control. Therefore, LCA chromatography was efficient in preserving the native properties of RABV-G that are essential in inducing an adequate humoral immune response. In addition, the purified RABV-G presented analytical potential as an ELISA reagent.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.