MedElevator
Войти в исследования Иммуногенность и антигеничность эктодомена Рабиса Вируса Гликпротеина устойчиво выражены в HEK293T Клетках.
Аннотация
Раби по-прежнему представляют собой серьезную угрозу для здоровья населения. Гликопротеин (RABV G) является основным антигенным вирусом бешенства и содержит нейтрализующие эпитопы, которые являются основными кандидатами на вакцины субъектов и диагностические антигены. Однако производство и очистка RRABV G при сохранении его антигенных и иммуногенных свойств по-прежнему являются проблемой. Здесь мы стремились создать платформу для производства и очистки RRABV G и определить иммуногенность и антигеничность RRABV G. Осколок CDNA, кодирующий растворимую форму RABV G, был синтезирован и клонирован в чечевичный экспрессивный вектор. Рекомбинантный чечевичный вектор LV-CMV-RABV G-eGPF был упакован, утилизирован и затем помещен в HEK 293T клетки. Клеточная культура была очищена с помощью никельной хроматографии и впоследствии подтверждена с помощью анализа Западного Блота и косвенного анализа иммуносорбента, связанного с ферментом (ELISA). ЭЛИСА использовала человеческую серу, полученную от лиц, которые были привиты с помощью коммерческой вакцины < < Очищенные верос > > . В частности, мы наблюдали нейтрализующую реакцию антител у иммунизированных свиней, а не у мышей. Это расхождение может быть связано с такими факторами, как нестабильность белка RRABV G, колебания реакции хост-компьютера и отклонения в используемом акваранте. Принимая во внимание все эти результаты, белок RRABV G, полученный в ходе этого исследования, является перспективным потенциальным кандидатом на вакцину для предотвращения бешенства.
Название и аннотация на языке оригинала
Immunogenicity and Antigenicity of the Ectodomain of Rabies Virus Glycoprotein Stably Expressed in HEK293T Cells.
Rabies continues to be a huge threat to public health. The rabies virus envelope glycoprotein (RABV G) is a major rabies virus antigen and contains neutralizing epitopes, which are primary candidates for subunit vaccines and diagnostic antigens. However, the production and purification of rRABV G while retaining its antigenic and immunogenic remains to be a challenge. Here, we aimed to establish a platform for rRABV G production and purification, and determine the immunogenicity and antigenicity of rRABV G. The cDNA fragment encoding the soluble form of RABV G was synthesized and cloned into a lentiviral expressing vector. Recombinant lentiviral vector LV-CMV-RABV G-eGFP was packaged, titered, and then transduced into HEK 293T cells. The cell culture supernatant was purified using nickel affinity chromatography and subsequently confirmed through Western Blot analysis and indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The ELISA utilized human sera obtained from individuals who had been vaccinated with the human commercial Purified Vero Cells Rabies Vaccine (PVRV). Notably, we observed a neutralizing antibody response in immunized pigs rather than in mice. This discrepancy could potentially be attributed to factors such as the instability of the rRABV G protein, variations in host responses, and variances in the adjuvant used. Taking all these findings into account, the rRABV G protein generated in this study exhibits promise as a potential vaccine candidate for the prevention of rabies.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.