MedElevator
Войти в исследования Репортер по серонейтрализации частиц вируса тикает энцефалит, преодолевая ограничения ELISA.
Аннотация
Вирус энцефалита (TBE) — самый распространенный в Европе ортофлавирус, передаваемый клещами. В силу неконкретного характера симптомов ТБЭ диагностируется главным образом по обнаружению конкретных антител в сыворотке пациента на основе ЭЛИСА. Однако перекрестная реактивность между ортофлавиирусами затрудняет диагностику. Вопросы специфичности могут быть смягчены с помощью нейтрализации сыворотки (SNT), хотя для обработки клинически значимых орфолавиирузов требуются условия уровня 3 по биобезопасности (BSL) и они характеризуются весьма различными вирусными кинетиками и трпизами клеток. В настоящем исследовании мы создали репортерскую частицу вируса (RVP) SNT, в которой инфекция измеряется люминесценцией и которая может осуществляться в условиях BSL-2. SNT для TBEV, основанный на RVP, продемонстрировал весьма значительную корреляцию с традиционным SNT на основе вируса (R2 = 0,8637, p < 0,0001). Анализы на основе RVP показали чувствительность 92,3% (95% CI: 79,7%-97,4%) и специфичность 100% (95% CI: 81,6%-100%). Мы также протестировали перекрестную реактивность образцов сыворотки на основе RVP-анализов на другие ортофлавиирузы (вирус желтой лихорадки, вирус денге типа 2, вирус Зика, вирус Западного Нила и японский энцефалит). Интересно отметить, что все образцы сыворотки, которые были испытаны БЦПВ-положительным с помощью ЭЛИСА, но отрицательными с помощью СНТ на основе RVP, были реактивными для антител в отношении других ортофлавиирузов. Таким образом, анализ серонейтрализации на основе РВП обеспечивает дополнительную ценность как в клинической диагностике, так и в эпидемиологических исследованиях.
Название и аннотация на языке оригинала
A reporter virus particle seroneutralization assay for tick-borne encephalitis virus overcomes ELISA limitations.
Tick-borne encephalitis (TBE) virus is the most prevalent tick-transmitted orthoflavivirus in Europe. Due to the nonspecific nature of its symptoms, TBE is primarily diagnosed by ELISA-based detection of specific antibodies in the patient serum. However, cross-reactivity between orthoflaviviruses complicates the diagnosis. Specificity issues may be mitigated by serum neutralization assays (SNT), although the handling of clinically relevant orthoflaviviruses requires biosafety level (BSL) 3 conditions and they have highly divergent viral kinetics and cell tropisms. In the present study, we established a reporter virus particle (RVP)-based SNT in which the infectivity is measured by luminescence and that can be performed under BSL-2 conditions. The RVP-based SNT for TBEV exhibited a highly significant correlation with the traditional virus-based SNT (R2 = 0.8637, p < 0.0001). The RVP-based assay demonstrated a sensitivity of 92.3% (95% CI: 79.7%-97.4%) and specificity of 100% (95% CI: 81.6%-100%). We also tested the cross-reactivity of serum samples in RVP-based assays against other orthoflaviviruses (yellow fever virus, dengue virus type 2, Zika virus, West Nile virus and Japanese encephalitis virus). Interestingly, all serum samples which had tested TBEV-positive by ELISA but negative by RVP-based SNT were reactive for antibodies against other orthoflaviviruses. Thus, the RVP-based seroneutralization assay provides an added value in clinical diagnostics as well as in epidemiological studies.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.