MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1007/s00253-023-12817-5
Развитие субвирусных частиц флавивируса с низкой поперечной реактивностью путем мутации отдельной антигенной области.
Аннотация
В качестве доминирующего эпитопа для поперечно-реактивных антител для противомоскитных флавиирузах (MBFVs) был отмечен наиболее сохранившийся петлю синтеза (FL), присутствующий в белке конверта флавивируса. В результате этого установление точной серодиагностики инфекций МБФВ было сопряжено с трудностями, поскольку антиФЛ-диагностика вызывается как естественными инфекциями, так и последующей вакцинацией. В этом исследовании мы изменили наиболее сохранившийся домен FL, чтобы преодолеть эту перекрестную реактивность. Мы продемонстрировали, что FL-домена флавивируса (ISFV) по роду насекомого I отличается антигеничностью от MBFV и ISFV, и определили ключевые аминокислотные остатки (G106, L107 или F108), которые способствуют антигенной разнице. Впоследствии эти мутации были введены в субвирусные частицы (SVP) вируса денге типа 2 (DENV2), вируса Зика (ZIKV), японского энцефалита (JEV) и вируса Западного Нила (WNV). При косвенных анализах иммуносорбента, связанных с ферментами (ЭЛИСА), эти мутанты, используемые в качестве антигенов, уменьшили связывание поперечно-реактивного иг и общего Иг, вызванного инфекцией ZIKV, JEV и WNV у мышей, и позволили чувствительным образом обнаружить конкретные антитела. Кроме того, иммунизация ZIKV или JEV SVP-мутантов спровоцировала производство антител с меньшей поперечной реактивностью до гетерологовых антигенов MBFV по сравнению с иммунизацией с дикими SVP у мышей. В этом исследовании подчеркивается эффективность внедрения мутаций в области FL в SVP MBFV с использованием аминокислот, полученных в результате ISFV, для производства антигенов SVP с низкой поперечной активностью и отмечается повышение точности косвенной серодиагностики инфекций MBFV на основе ЭЛИСА. * В области FL ISFV антигеничность отличается от антигеничности MBFV. • Мутативные SVP уменьшают связь между трансреактивными антителами в косвенных ELISA. • Инокуляция мутированных SVP вызывает антитела с низкой поперечной реактивностью.
Название и аннотация на языке оригинала
Development of flavivirus subviral particles with low cross-reactivity by mutations of a distinct antigenic domain.
The most conserved fusion loop (FL) domain present in the flavivirus envelope protein has been reported as a dominant epitope for cross-reactive antibodies to mosquito-borne flaviviruses (MBFVs). As a result, establishing accurate serodiagnosis for MBFV infections has been difficult as anti-FL antibodies are induced by both natural infection and following vaccination. In this study, we modified the most conserved FL domain to overcome this cross-reactivity. We showed that the FL domain of lineage I insect-specific flavivirus (ISFV) has differences in antigenicity from those of MBFVs and lineage II ISFV and determined the key amino acid residues (G106, L107, or F108), which contribute to the antigenic difference. These mutations were subsequently introduced into subviral particles (SVPs) of dengue virus type 2 (DENV2), Zika virus (ZIKV), Japanese encephalitis virus (JEV), and West Nile virus (WNV). In indirect enzyme-linked immunosorbent assays (ELISAs), these SVP mutants when used as antigens reduced the binding of cross-reactive IgG and total Ig induced by infection of ZIKV, JEV, and WNV in mice and enabled the sensitive detection of virus-specific antibodies. Furthermore, immunization of ZIKV or JEV SVP mutants provoked the production of antibodies with lower cross-reactivity to heterologous MBFV antigens compared to immunization with the wild-type SVPs in mice. This study highlights the effectiveness of introducing mutations in the FL domain in MBFV SVPs with lineage I ISFV-derived amino acids to produce SVP antigens with low cross-reactivity and demonstrates an improvement in the accuracy of indirect ELISA-based serodiagnosis for MBFV infections. KEY POINTS: • The FL domain of Lineage I ISFV has a different antigenicity from that of MBFVs. • Mutated SVPs reduce the binding of cross-reactive antibodies in indirect ELISAs. • Inoculation of mutated SVPs induces antibodies with low cross-reactivity.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.