MedElevator Войти в исследования
← Поиск публикаций

DOI 10.1016/j.jviromet.2020.113876

Медицинская библиотека · Journal of virological methods · 2020

Разработка иммуносорбента для серодиагностики японского энцефалита в свиньях на месте.

Chauhan J, Dhanze H, Kumar H B Chethan, Kumar M Suman, Bhilegaonkar K N

СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАМашинный перевод · не проверен

Аннотация

Японский энцефалит (JE) является важным вирусным зоонотическим заболеванием в Азии, особенно в сельских и пригородных районах, где сосуществуют выращивание риса и свиноводство. Свиньи служат подходящей моделью наблюдения, наблюдение за которой могло бы спрогнозировать потенциальную вспышку JE среди людей в непосредственной близости. Однако существующая диагностика, такая как ЭЛИСА и VNT, требует сложных лабораторных средств, которые чаще всего отсутствуют в полевых условиях. В настоящем исследовании мы стремились разработать рекомбинантную неструктурную (NS1) белковую диптушку IgG ELISA в качестве анализа на месте для серодиагностики JE в свиньях. Анализ был стандартизирован путем оптимизации различных параметров, и следующие условия были признаны идеальными, включая 1 мкг белка rNS1 в карбонатном буфере на полосу мембраны с нитроцеллюлозой; альбумин говяжьей сыворотки как блокирующий агент при 4 °C за ночь; разбавление сыворотки 1:10 и разбавление в браке 1:5000 в молочном порошке. Относительная диагностическая чувствительность и специфичность Иг-ИГ ЭЛИСА составляли соответственно 100% и 92,9%. В соответствии с руководящими принципами МЭБ в трех лабораториях была проведена проверка на предмет наличия мазка. Срок хранения помада составлял до 7 месяцев в 4 °C. Проверку легко провести, и результаты можно интерпретировать с помощью визуального наблюдения, исключающего необходимость абсорбирующего оборудования для считывания показаний. Был сделан вывод о том, что стандартный анализ на предмет определения содержания сыворотки свиней в полевых условиях является многообещающим. Своевременное обнаружение вируса JE у свиней поможет прогнозировать вспышку вируса у людей и, таким образом, принимать надлежащие профилактические и контрольные меры.

Для цитирования: Chauhan J, Dhanze H, Kumar H B Chethan, Kumar M Suman, Bhilegaonkar K N. Development of dipstick enzyme linked immunosorbent assay for on-site sero-diagnosis of Japanese encephalitis in swine.. Journal of virological methods. 2020. DOI: 10.1016/j.jviromet.2020.113876.
Название и аннотация на языке оригинала

Development of dipstick enzyme linked immunosorbent assay for on-site sero-diagnosis of Japanese encephalitis in swine.

Japanese encephalitis (JE) is an important viral zoonotic disease in Asia, especially in rural and suburban areas where rice cultivation and pig farming coexist. Pigs serve as a suitable sentinel model, the surveillance of which could predict a potential JE outbreak in human population in the immediate vicinity. However, existing diagnostics like ELISA and VNT require sophisticated laboratory facilities which are more often not available in field conditions. In the present study, we aimed at developing recombinant non-structural (NS1) protein-based dipstick IgG ELISA as an on-site assay for sero-diagnosis of JE in swine. The assay was standardized by optimizing various parameters and the following conditions were found to be ideal including 1 μg of rNS1 protein in carbonate buffer per strip of nitrocellulose membrane comb; bovine serum albumin as blocking agent at 4 °C overnight; serum dilution of 1:10 and conjugate dilution of 1:5000 in skimmed milk powder. Relative diagnostic sensitivity and specificity of dipstick IgG ELISA was 100% and 92.9%, respectively. The dipstick assay was validated in three laboratories as per OIE guidelines. The storage life of dipstick was up to 7 months at 4 °C. The assay is easy to perform and the results can be interpreted with visual observation that precludes the need for absorbance reading equipment. The standardized dipstick assay was found promising for screening swine serum samples in field conditions. Timely detection of JE virus in swine will aid in predicting the outbreak in humans and thus in taking suitable preventive and control measures.

Предметные рубрики MeSH

Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…

История · было → стало

Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.

Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.