MedElevator
Войти в исследования Типовая система для создания композиций оплодотворения вирусом тик-Борна Энцефалита без оплодотворения вирусом РНК.
Аннотация
Флавивирус — это позитивный, однострунный вирусный род РНК, при этом его члены вызывают серьезные заболевания у людей, такие, как энцефалит тика, желтая лихорадка и лихорадка денге. Известно, что флавивирусы вызывают реконструирование внутриклеточных мембран в небольшие канавы, где происходит воспроизведение вирусной РНК. Неструктурные (NS) белки не являются частью пальто вируса и, как предполагается, участвуют в формировании этих вирусных репликационных отсеков (RC). Здесь мы использовали вирус энцефалита (ТБЭВ) в качестве модели для флавивирусов и разработали стабильную линию человеческих клеток, в которой выражение белков NS может быть вызвано без воспроизводства вирусной РНК. Описываемая модель представляет собой новаторский и доброкачественный инструмент для изучения вирусных компонентов под контролируемым уровнем экспрессии. Мы показываем, что шести белков NS достаточно для расширения эндоплазмической ретикулума (ER) и образования мембранных инвагинаций, подобных RC. Протеины NS образуют комплекс, связанный с мембраной в ER, и электрон-томография показывает, что расширенные участки ER тесно связаны с липидными капельками и митохондрией. Мы предлагаем, чтобы белки NS привели к реконструкции мембран ER и чтобы не требовались вирусные RNA, репликация RNA, вирусная полимераза и ТБЭВ-структурные белки. Как и другие флавивирусы, ТБЭВ использует внутриклеточные мембраны для создания КР для вирусного воспроизведения. Было предложено включить в этот процесс вирусные белки НС; однако механизм формирования КР и роли отдельных белков НС остаются неясными. Для изучения того, как ТБЭВ вызывает реконструирование мембраны, мы разработали инъекционную стабильную систему клеток, выражающую ТБЭВ NS полипротеин в отсутствие вирусного репликации РНК. Используя эту систему, мы смогли воспроизвести RC-подобные RC везикулы, которые напоминали RC, образовавшиеся в инфицированных флавирусом клетках, с точки зрения морфологии и размера. Эта клеточная система является надежным инструментом, облегчающим изучение образования флавиварных КР, и идеальной моделью для выявления антивирусных агентов на более низком уровне биобезопасности.
Название и аннотация на языке оригинала
Model System for the Formation of Tick-Borne Encephalitis Virus Replication Compartments without Viral RNA Replication.
Flavivirus is a positive-sense, single-stranded RNA viral genus, with members causing severe diseases in humans such as tick-borne encephalitis, yellow fever, and dengue fever. Flaviviruses are known to cause remodeling of intracellular membranes into small cavities, where replication of the viral RNA takes place. Nonstructural (NS) proteins are not part of the virus coat and are thought to participate in the formation of these viral replication compartments (RCs). Here, we used tick-borne encephalitis virus (TBEV) as a model for the flaviviruses and developed a stable human cell line in which the expression of NS proteins can be induced without viral RNA replication. The model system described provides a novel and benign tool for studies of the viral components under controlled expression levels. We show that the expression of six NS proteins is sufficient to induce infection-like dilation of the endoplasmic reticulum (ER) and the formation of RC-like membrane invaginations. The NS proteins form a membrane-associated complex in the ER, and electron tomography reveals that the dilated areas of the ER are closely associated with lipid droplets and mitochondria. We propose that the NS proteins drive the remodeling of ER membranes and that viral RNA, RNA replication, viral polymerase, and TBEV structural proteins are not required.IMPORTANCE TBEV infection causes a broad spectrum of symptoms, ranging from mild fever to severe encephalitis. Similar to other flaviviruses, TBEV exploits intracellular membranes to build RCs for viral replication. The viral NS proteins have been suggested to be involved in this process; however, the mechanism of RC formation and the roles of individual NS proteins remain unclear. To study how TBEV induces membrane remodeling, we developed an inducible stable cell system expressing the TBEV NS polyprotein in the absence of viral RNA replication. Using this system, we were able to reproduce RC-like vesicles that resembled the RCs formed in flavivirus-infected cells, in terms of morphology and size. This cell system is a robust tool to facilitate studies of flavivirus RC formation and is an ideal model for the screening of antiviral agents at a lower biosafety level.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.