Флавивирусная инфекция лопатки Ixodes (Black-Leged Tick) Ex Vivo органотипные культуры и приложения для борьбы с заболеваниями.
Аннотация
Иксоды с лопаточными клещами передают многие инфекционные агенты, которые вызывают заболевания, включая транслируемые клещами флавирузы (ТБФВ). Ежегодно во всем мире инфекция ТБФВ вызывает тысячи случаев заболевания энцефалитом человека. В Соединенных Штатах число людей, инфицированных ТБФВ вирусом Повассан (POWV), увеличивается и составляет от 10 до 30 процентов. Кроме того, вирус Langat (LGTV) — BBFV с низкой нейровинулентностью и используется в качестве модели TBFV. Репликация и распространение ТБФВ внутри I. скобулярные органы плохо характеризуются, и более глубокое понимание вирусной биологии в этом векторе может послужить основой для эффективных контрмер по сокращению передачи ТБФВ. Здесь мы описываем краткосрочные, I. скопулярные модели синдрома туберкулёзной инфекции. Органы ex vivo были метаболически активными в течение 9-10 дней и допускали воспроизведение LGTV и POWV. Воображение и видеография продемонстрировали воспроизводство и распространение зеленого флуоресцентного белка LGTV в органах. Иммуногистохимическое пятно подтвердило наличие конверта LGTV и белкового синтеза POWV внутри инфицированных органов. Органы, инфицированные ЛГТВ и POWV, производят инфекционные ЛГТВ и POWV; таким образом, культуры ex vivo подходят для изучения репликации вируса в отдельных органах. ЛГТВ- и POWV-зараженные серебристые и слюнные железы подвергались двойному трансплантации РНК (dsRNA) с dsRNA в непереведенную область LGTV 3' (UTR), что позволило сократить инфекционное воспроизведение LGTV и POWV, что является доказательством концептуального использования интерференции РНК в культурах органов I. скопулариса для изучения воздействия на репродукцию ТБТС. Полученные результаты позволяют получить важную информацию о локализации ТБФВ в рамках ex vivo I. scapularis органов и являются важным инструментом перевода для оценки рекомбинанта, кандидатов на живую вакцину, а также потенциальных тиковых стенограмм и белков для возможного терапевтического использования и разработки вакцин для сокращения передачи ТБФВ. Инфекции, передаваемые через ТБФВ, вызывают у людей во всем мире неврологические и/или геморрагические заболевания. В настоящее время не существует лицензированных терапевтических препаратов или вакцин против вируса Повассан (POWV), единственного ТБФВ, который, как известно, циркулирует в Северной Америке. Оценка целевых показателей векторных тиканий для противомоскитных вакцин, направленных на сокращение числа случаев заражения ТБФВ внутри вектора артропод, является важнейшим шагом в определении эффективных подходов к контролю за передачей ТБФВ. Это исследование характеризовало инфекцию женских черепах иксодами тикают органные культуры среднегатных, слюнных желез и синганглиона с вирусом с низким уровнем неурожайности Langat (LGTV) и более патогенным POWV. Виды клеток конкретных органов были подвержены воздействию инфекции ТБФВ, а в организмах, инфицированных ТБФВ, были отмечены различия в репликации ЛГТВ и POWV. Эта модель клещей-органической культуры инфекции ТБФВ будет полезной для различных видов применения, таких, как проверка клещей- эндогенных дсРНК в соответствии с потенциальными контрольными мишенями в средних горных и слюнных железах для подтверждения ограничений на инфекцию ТБФВ.
Название и аннотация на языке оригинала
Flavivirus Infection of Ixodes scapularis (Black-Legged Tick) Ex Vivo Organotypic Cultures and Applications for Disease Control.
Ixodes scapularis ticks transmit many infectious agents that cause disease, including tick-borne flaviviruses (TBFVs). TBFV infections cause thousands of human encephalitis cases worldwide annually. In the United States, human TBFV infections with Powassan virus (POWV) are increasing and have a fatality rate of 10 to 30%. Additionally, Langat virus (LGTV) is a TBFV of low neurovirulence and is used as a model TBFV. TBFV replication and dissemination within I. scapularis organs are poorly characterized, and a deeper understanding of virus biology in this vector may inform effective countermeasures to reduce TBFV transmission. Here, we describe short-term, I. scapularis organ culture models of TBFV infection. Ex vivo organs were metabolically active for 9 to 10 days and were permissive to LGTV and POWV replication. Imaging and videography demonstrated replication and spread of green fluorescent protein-expressing LGTV in the organs. Immunohistochemical staining confirmed LGTV envelope and POWV protein synthesis within the infected organs. LGTV- and POWV-infected organs produced infectious LGTV and POWV; thus, the ex vivo cultures were suitable for study of virus replication in individual organs. LGTV- and POWV-infected midgut and salivary glands were subjected to double-stranded RNA (dsRNA) transfection with dsRNA to the LGTV 3' untranslated region (UTR), which reduced infectious LGTV and POWV replication, providing a proof-of-concept use of RNA interference in I. scapularis organ cultures to study the effects on TBFV replication. The results contribute important information on TBFV localization within ex vivo I. scapularis organs and provide a significant translational tool for evaluating recombinant, live vaccine candidates and potential tick transcripts and proteins for possible therapeutic use and vaccine development to reduce TBFV transmission.IMPORTANCE Tick-borne flavivirus (TBFV) infections cause neurological and/or hemorrhagic disease in humans worldwide. There are currently no licensed therapeutics or vaccines against Powassan virus (POWV), the only TBFV known to circulate in North America. Evaluating tick vector targets for antitick vaccines directed at reducing TBFV infection within the arthropod vector is a critical step in identifying efficient approaches to controlling TBFV transmission. This study characterized infection of female Ixodes scapularis tick organ cultures of midgut, salivary glands, and synganglion with the low-neurovirulence Langat virus (LGTV) and the more pathogenic POWV. Cell types of specific organs were susceptible to TBFV infection, and a difference in LGTV and POWV replication was noted in TBFV-infected organs. This tick organ culture model of TBFV infection will be useful for various applications, such as screening of tick endogenous dsRNA corresponding to potential control targets within midgut and salivary glands to confirm restriction of TBFV infection.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.