MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1016/j.jviromet.2010.07.022
Микробная электрохимия, иммунизация для обнаружения и идентификации венесуэльского энцефалита.
Аннотация
Для обнаружения и идентификации венесуэльского энкинэцефалита (VEEV) была разработана электрохимилюминесценция (ECL) иммунасса, включающая химический биотинилизованный и рутенилированный антитела, отобранный из панели моноклонных и поликлонных реагентов. Предел обнаружения (LOD) оптимизированного анализа ECL составлял 10(3)pfu/ml VEV TC-83 и 1 нг/мл рекомбинанта (r) белка VEV E2. LOD-анализа ECL был примерно на одну единицу меньше, чем у сэндвича с иммуносорбентом (ELISA) с тем же иммуноактивным агентом. Повторное использование ЭОД с течением времени и различными операторами показало, что эта оценка является воспроизводимой (коэффициент вариации 4,7 - 18,5% ежемесячно; 3,3 - 8,8% человеко-лично). Анализ ОВЭВ не выявил перекрестной реактивности с двумя тесно связанными альфавирусами или с 21 гетерологическим биологическим агентом. На предмет полезности для обнаружения rE2 была проведена оценка генетически биотинилированного рекомбинированного антитела VEV MA116SBP; хотя в ECL-анализе LOD функционировал на два бревена выше (100 нг/мл против 1 нг/мл), используя MA116SBP, чем в случае использования химического биотинилированного антитела. В ходе анализа ИКВ было обнаружено, что VEEV находится на самом низком уровне LOD (самая высокая чувствительность), о чем до этого сообщалось в опубликованной литературе, а результаты ECL были получены за 60 мин. по сравнению с периодом в 6-8 часов, требуемым для ЭЛИСА. Результаты показали наличие чувствительной, быстрой и полностью автоматизированной иммунной системы ECL для обнаружения и идентификации VEV.
Название и аннотация на языке оригинала
Microbead electrochemiluminescence immunoassay for detection and identification of Venezuelan equine encephalitis virus.
An electrochemiluminescence (ECL) immunoassay, incorporating chemically biotinylated and ruthenylated antibodies down-selected from a panel of monoclonal and polyclonal reagents, was developed to detect and identify Venezuelan equine encephalitis virus (VEEV). The limit of detection (LOD) of the optimized ECL assay was 10(3)pfu/ml VEEV TC-83 virus and 1 ng/ml recombinant (r) VEEV E2 protein. The LOD of the ECL assay was approximately one log unit lower than that of a sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) incorporating the same immunoreagents. Repetition of ECL assays over time and by different operators demonstrated that the assay was reproducible (coefficient of variation 4.7-18.5% month-to-month; 3.3-8.8% person-to-person). The VEEV ECL assay exhibited no cross-reactivity with two closely related alphaviruses or with 21 heterologous biological agents. A genetically biotinylated recombinant VEEV antibody, MA116SBP, was evaluated for utility for detection of rE2; although functional in the ECL assay, the LOD was two log units higher (100 ng/ml vs 1 ng/ml) using MA116SBP than when chemically biotinylated antibody was used. The ECL assay detected VEEV at the lowest LOD (highest sensitivity) hitherto reported in the published literature and ECL assay results were generated in ∼60 min compared to a 6-8h period required for ELISA. Results have demonstrated a sensitive, rapid, and fully automated ECL immunoassay for detection and identification of VEEV.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.