MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1371/journal.ppat.1008588
Флуоресцентный белковый помет аденовальных белков pV и pIX показывает "запоздалый аккумулирующий отсек вирионов".
Аннотация
Человеческий аденовирус типа 5 (HAdV5) вызывает заболевания верхнего и нижнего дыхательных путей. Были подробно изучены первые этапы внедрения HADV5 в репродукцию генома в принимающем ядре. Однако поздние стадии инфицирования по-прежнему плохо понимаются. Здесь мы собрались для того, чтобы прояснить спонтанное оркестрирование последних аденовирусных ядерных реконструаций в живых клетках. Мы создали вирусные мутанты, выражающие флуоресцентно помеченный белок IX (pIX) и белок V (pV) соответственно, капсид и вирусный геном. Мы выяснили, что во время выращивания потомства оба белка попадают в бесмембранный, ядерный отсек, который очень непроницаем, так что в иммунофлюоресценции микроскопия антител едва может проникнуть в него. Мы назвали это отделение "запоздалым отсеком накопления вирионов" (LVAC). Корреляция между свето- и электронной микроскопией показала, что LVAC содержит паракристаллические сети вирусных капсидов, которые плотно упаковываются в такую же сотовую организацию вирусной ДНК. Микроскопия с живыми клетками, а также измерения FRAP показали, что LVAC является жестким и ограничивает диффузию более крупных молекул, что указывает на то, что капсиды застряли внутри.
Название и аннотация на языке оригинала
Fluorescent protein tagging of adenoviral proteins pV and pIX reveals 'late virion accumulation compartment'.
The human adenovirus type 5 (HAdV5) causes disease of the upper and lower respiratory tract. The early steps of HAdV5 entry up to genome replication in the host nucleus have been extensively studied. However, late stages of infection remain poorly understood. Here, we set out to elucidate the spatiotemporal orchestration of late adenovirus nuclear remodeling in living cells. We generated virus mutants expressing fluorescently tagged protein IX (pIX) and protein V (pV), a capsid and viral genome associated protein, respectively. We found that during progeny virion production both proteins localize to a membrane-less, nuclear compartment, which is highly impermeable such that in immunofluorescence microscopy antibodies can hardly penetrate it. We termed this compartment 'late virion accumulation compartment' (LVAC). Correlation between light- and electron microscopy revealed that the LVAC contains paracrystalline arrays of viral capsids that arrange tightly packed within a honeycomb-like organization of viral DNA. Live-cell microscopy as well as FRAP measurements showed that the LVAC is rigid and restricts diffusion of larger molecules, indicating that capsids are trapped inside.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.