Biochemistry · 2009
In vitro characterization of a heterologously expressed nonribosomal Peptide synthetase involved in phosphinothricin tripeptide biosynthesis.
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Lee Jin-Hee, Evans Bradley S, Li Gongyong, Kelleher Neil L, van der Donk Wilfred A
Аннотация
The late stages of biosynthesis of phosphinothricin tripeptide (PTT) involve peptide formation and methylation on phosphorus. The exact timing of these transformations is not known. To provide insight into this question, we developed a heterologous expression system for PhsA, one of three NRPS proteins in PTT biosynthesis. The apparent k(cat)/K(m) value for ATP-pyrophosphate exchange activity for d,l-N-acetylphosphinothricin was 3.5 muM(-1) min(-1), whereas the k(cat)/K(m,app) for l-N-acetyldemethylphosphinothricin was 0.5 microM(-1) min(-1), suggesting the former might be the physiological substrate. Each substrate could be loaded onto the phosphopantetheine arm of the thiolation domain as observed by Fourier transform mass spectrometry (FTMS).