Исследования по изучению взаимодействия опухолей и опухолей HD5 " Альфа-Защитники " с аденовирусами и последствий для онколитической аденовой терапии.

Защитники представляют собой небольшие антимикробные пептиды, способные нейтрализовать аденовирус человека (HAdV) in vitro с помощью связывающих протеинов капсида и блокирующих эндозомное утечку вируса. В организме человека альфа-дефенсин HD5 производится специализированными эпителиальными клетками желудочно-кишечных и генито-уровневых трактов. Здесь мы показываем, используя образцы биопсии пациентов, что HD5 также выражается как активный, скрытый пептид эпителиальных яичников и раковых клеток легких на месте. Этот вывод побудил нас изучить роль HD5 в инфекции и распространении репликации, онколитического HADV типа 3 (HAdV3). HADV3 производит большое количество пентон-додекаэдры (PtDd), похожих на вирус частиц, во время репликации. Ранее мы демонстрировали, что PtDd участвует в открытии эпителиальных перекрестков, что облегчает боковое распространение вирионов деново. Здесь мы описываем вторую функцию PtDd, а именно блокирование HD5. Центральным средством доказательства того, что вирус PtDd нейтрализует HD5 и поддерживает распространение вируса потомства, был вирус HadV3 мутанта, в котором было отключено образование PtDd (Mut-Ad3GF, где GPF является зеленым флуоресцентным протеином). Мы продемонстрировали, что вирусное распространение Mut-Ad3GPF было заблокировано синтетическим HD5, в то время как дикая форма (wt) (wt-Ad3GF) подверглась лишь минимальному воздействию. В клетках рака кишечной клетки Caco-2 инъекция клеточного выражения HD5 с помощью фибробластного коэффициента роста 9 (FGF9) значительно сдерживает вирусное распространение и производство вирусов потомства Mut-Ad3GPF, но не Wt-AD3GPF. Наконец, экстемическое выражение HD5 в клетках опухоли уменьшило виво онколитическая активность Mut-Ad3GPF, но не wt-AD3GF. Эти данные свидетельствуют о создании нового механизма HADV3 для преодоления врожденных антивирусных реакций. Наше исследование имеет последствия для онколитической аденовирусной терапии. Ранее сообщалось, что человек дефенсин HD5 активирует конкретные человеческие аденовирусы, связываясь с капсидом белков и блокируя эндосомное утечку вируса. В нашей рукописи описаны следующие новые основные выводы: i) обнаружение нового механизма, используемого серотипом 3 человеческого аденовируса для преодоления врожденной антивирусной реакции, основанной на способности HADV3 производить субвирусные пентон-додекаэдральные частицы, которые выступают в качестве приманки для HD5, предотвращая тем самым активацию вирусного потомства, полученного при репликации; ii) демонстрация того, что эктотическое выражение HD5 в раковых клетках снижает онколитическая эффективность аденовирусного вектора серотипа 5; и iii) демонстрация того, что эпителиальный яичник и рак легких выражают HD5. Исследование помогает нам лучше понять, как аденовирусы создают инфекцию в эпителиальных тканях и имеют последствия для лечения рака с онколитической аденовирусной терапией.