Волосатый Ribozime Genes Curtle Aлкоголь: от рационального дизайна до воздействия в vivo в Крысе.

Гены Рибозима были разработаны таким образом, чтобы уменьшить добровольное употребление алкоголя в крысиной модели алкогольной зависимости. Ацеталдегид, образующийся из алкоголя в печени, метаболизируется митохондриальным альдегидом дегидрогеназы (ALDH2) таким образом, что уменьшение активности ALDH2 приводит к обратному воздействию ацеталдегида крови на потребление алкоголя. Был применен поэтапный подход к проектированию генов, кодирующих рипозимы, предназначенные для крыс ALDH2 mRNA. В ходе исследований in vitro, посвященных доступности олигонуклеотидов, были выявлены подходящие целевые объекты в МRNA, один из которых отвечал требованиям в отношении молотка и рипозима для волос (CGGUC). В крысиных клетках в культуре были испытаны гены из ribozime, поставленные в плазмидных конструкциях. В то время как рипозим для волос уменьшил активность АЛДХ2 на 56% благодаря декольте и блокаде (P <0,0001), рипозим молотка вызвал незначительные последствия блокады. Рибозим с причёсками был протестирован в vivo с помощью аденовирального гена, доставленного к крысам, употребляющим алкоголь. Потребление этанола было сокращено на 47% в течение 34 дней (P <0,0001), в то время как ацеталдегид крови более чем удвоился при применении этанола, а активность ALDH2 упала на 25% в гомогенатах печени без воздействия на другие изоформы ALDH. Таким образом, рипозимы, предназначенные для 16 нг в АЛДХ2 МРНК, оказывают долговременное и конкретное воздействие на vivo, что является улучшением предыдущей работы и способствует развитию генной терапии алкоголизма.