MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1186/s12985-026-03120-6
Разработка справочных материалов на основе РНК по вирусу лихорадки Рифт-Вэлли.
Аннотация
В основном в африканских странах поступает информация о вирусе лихорадки Рифт-Вэлли (RVFV), и молекулярная диагностика проводится с использованием тестов на амплификацию нуклеиновой кислоты. Справочные материалы для нуклеиновой кислоты (RM) необходимы для оценки эффективности и качества молекулярной диагностики лихорадки долины Рифт. Однако в настоящее время отсутствуют метрологические сертифицированные РМ для нуклеиновых кислот RVFV.
МЕТОДЫ
В этом исследовании RNA RNA RVFV (KRISS 111-10-537, 538 и 539) были разработаны на основе in vitro транскрибированной RNA, содержащей трехсегментный геном, включая сегменты L, M и S. Номера копий L, M и S сегментов RM измерялись с использованием цифрового PCR (RT-dPCR), который является передовой технологией, позволяющей получить абсолютную количественную оценку вирусного генетического материала.
РЕЗУЛЬТАТЫ
В ходе анализа однородности значения количества копий были измерены на уровне от 7,82 × 104 до 2,51 копий × 106 копий/млл, а степень соответствия между различными бутылками этих РМ составляла лишь 4,0-6,7%. Эти справочные материалы продемонстрировали высокую стабильность, сохраняя стабильность в течение 14 дней при температуре 4°C и при температуре -80°C в течение 12 месяцев. Такая стабильность и последовательность обеспечивают, чтобы лаборатории во всем мире могли полагаться на эти материалы для проведения точных испытаний.
ВЫВОДЫ
РМ могут способствовать сокращению ложных положительных и отрицательных значений в молекулярных тестах RVFV путем предоставления точных исходных значений целевых значений вирусных копий генов, что в конечном счете будет способствовать улучшению диагностики и борьбы с этим вирусным заболеванием.
Название и аннотация на языке оригинала
Development of reference material from Rift Valley fever virus RNA.
BACKGROUND
Rift Valley fever virus (RVFV) has mainly been reported in African countries, and molecular diagnosis is performed using nucleic acid amplification tests. Nucleic acid reference materials (RMs) are necessary for the performance evaluation and quality assessment of molecular diagnosis of Rift Valley fever. However, metrological certified RMs for RVFV nucleic acids are currently unavailable.
METHODS
In this study, RVFV RNA RMs (KRISS 111-10-537, 538, and 539) were developed from in vitro transcribed RNA containing a three-segment genome, including the L, M, and S segments. The RNA copy numbers of the L, M, and S segments of RMs were measured using reverse-transcription droplet digital PCR (RT-ddPCR), an advanced technology that enables the absolute quantification of viral genetic material.
RESULTS
In the homogeneity analysis, the copy number values were measured to be from 7.82 × 104 to 2.51 × 106 copies/µl, and the consistency between different bottles of these RMs showed variation of only 4.0-6.7%. These reference materials demonstrated excellent stability, remaining stable for up to 14 days at 4°C and at -80 °C for 12 months. This stability and consistency ensure that laboratories worldwide can rely on these materials for accurate testing.
CONCLUSIONS
RMs can help reduce false positives and negatives in RVFV molecular tests by providing accurate reference values for target viral gene copy numbers, ultimately contributing to better diagnosis and control of this viral disease.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.