Бесоборудование, сольная иммобилизация нуклеиновых кислот для анализа бокового потока нуклеиновой кислоты.
Аннотация
Поскольку мир сталкивается с рядом смертельных вирусных кризисов, в том числе с вирусом Зика, вирусом Эбола, острым острым респираторным синдромом, синдромом дыхания на Ближнем Востоке (МЕРС) и болезнью коронавируса 2019 года (COVID-19), большое внимание уделяется боковым анализам (LFA), которые требуют минимального оборудования для лечения вирусных инфекционных заболеваний. В связи с этим растет спрос на сокращение времени и расходов, необходимых для производства ЛФА. В настоящее время в рамках исследования применяется безаппаратурный метод обезвреживания соли нуклеиновыми кислотами (САИОН) для ЛФА. По сравнению с общими методами иммобилизации ДНК, такими, как стрептавидин-биотин, ультрафиолетовое облучение и термическая обработка, наш метод не требует специального оборудования (например, центрифуг, УФ-перекресток, нагревательное устройство); таким образом, он может применяться в условиях ограниченности ресурсов с меньшими затратами на производство. Процесс иммобилизации был упорядочен и завершен в течение 30 минут. Наш метод позволил улучшить цветной сигнал примерно в 14 раз по сравнению с этим методом без использования SAION и продемонстрировал воспроизводимость при долгосрочной стабильности хранения. Предлагаемый метод может использоваться для выявления практических целей (например, SARS-COV-2) и облегчает весьма чувствительное и избирательное обнаружение целевых нуклеиновых кислот с множительной способностью и без какой-либо перекрестной реактивности. Эта новая стратегия иммобилизации обеспечивает основу для легкого и недорогого развития ЛФА с нуклеиновой кислотой в сочетании с различными типами усиления нуклеиновой кислоты.
Название и аннотация на языке оригинала
Equipment-free, salt-mediated immobilization of nucleic acids for nucleic acid lateral flow assays.
As the world has been facing several deadly virus crises, including Zika virus disease, Ebola virus disease, severe acute respiratory syndrome (SARS), Middle East respiratory syndrome (MERS), and Coronavirus disease 2019 (COVID-19), lateral flow assays (LFAs), which require minimal equipment for point-of-care of viral infectious diseases, are garnering much attention. Accordingly, there is an increasing demand to reduce the time and cost required for manufacturing LFAs. The current study introduces an equipment-free method of salt-mediated immobilization of nucleic acids (SAIoNs) for LFAs. Compared to general DNA immobilization methods such as streptavidin-biotin, UV-irradiation, and heat treatment, our method does not require special equipment (e.g., centrifuge, UV-crosslinker, heating device); therefore, it can be applied in a resource-limited environment with reduced production costs. The immobilization process was streamlined and completed within 30 min. Our method improved the color intensity signal approximately 14 times compared to the method without using SAIoNs and exhibited reproducibility with the long-term storage stability. The proposed method can be used to detect practical targets (e.g., SARS-CoV-2) and facilitates highly sensitive and selective detection of target nucleic acids with multiplexing capability and without any cross-reactivity. This novel immobilization strategy provides a basis for easily and inexpensively developing nucleic acid LFAs combined with various types of nucleic acid amplification.
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.