MedElevator
Войти в исследования Производство и характеристика моноклональных антител против N Protein из Вируса лихорадки Рифт-Вэлли.
Аннотация
Осколки ДНК, кодирующие основной антигенный район, аа 14-245 на N-белке вируса Рифт-Вэлли (RVFV), были клонированы в вектора PET-28a (+) и p3xFLAG-CMV-10. Рекомбинантный белок PET-28a-N1 был выращен в Escherichia coli BL21 (DE3) с 1 мм изоппил-б-тио-галактопиранасид при температуре 37°C в течение 5 часов и очищен белковым очищателем. Три моноклональных антитела (mAbs) под названием 3A5, 3A6 и 3A7 против N-белка были получены с помощью взрывателя клеточной линии мыши миэломы SP2/0 с селезенками лимфоцитов из мышей PET-28a-N1 с белковым иммунизированными мышами. И наконец, MAb были отмечены иммуносорбентами, связанными с ферментами, опосредованными иммунофлюоресцирующими анализами и западными пятнами. Результаты показывают, что все MAb обладают высокой специфичностью и реагируют как на прокариотические, так и на эукариотические N-белки, которые могут обеспечить важные материалы для исследований функции N-белка и диагностических методов RVFV.
Название и аннотация на языке оригинала
Production and Characterization of Monoclonal Antibodies Against N Protein of Rift Valley Fever Virus.
The DNA fragment encoding predicted main antigenic region, aa 14-245 on N protein of Rift Valley virus (RVFV) was cloned into the vector pET-28a (+) and p3xFLAG-CMV-10. The recombinant pET-28a-N1 protein was expressed in Escherichia coli BL21 (DE3) with 1 mM isopropyl-b-thio-galactopyranoside at 37°C for 5 hours, and purified by protein purifier. Three monoclonal antibodies (mAbs) named 3A5, 3A6, and 3A7 against N protein were obtained by fusing mouse myeloma cell line SP2/0 with spleen lymphocytes from pET-28a-N1 protein-immunized mice. Finally, the mAbs were characterized by enzyme-linked immunosorbent assays, indirect immunofluorescent assays, and Western blot. The results show that all the mAbs possess high specificity and react with both prokaryotic and eukaryotic N protein, which could provide important materials for the research on the function of N protein and the diagnostic methods of RVFV.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.