MedElevator
Войти в исследования DOI 10.1371/journal.pntd.0012834
Разработка и определение характеристик обратной генетической системы для штамма вируса Мачупо по линии второго Чикава в модели морских свиней.
Аннотация
Вирус Мачупо (MACV) — маммаренавирус в Новом мире (далее именуемый «аренавирус») и этиологический агент боливийской геморрагической лихорадки (BHF). Для БХФ не существует ни вакцины, ни противовирусной терапии, что приводит к 35-процентной смертности людей. В разных местах арены нового мира развиваются по отдельности. На сегодняшний день в Боливии выявлено до восьми рядов МКАВ. В то время как прототип штамма MACV Carvallo принадлежит родословной, которую я обнаружил в провинции Мемор в 1960-х годах, штаммы линии II MACV стали доминирующей циркуляционной линией в той же провинции с 1993 года.Мы сообщаем о разработке обратной генетической системы для штамма МАКВ II Chicava, используя PRF42 пласмид кодирования L и S сегмент геномной РНК под контролем транскрипции модели PNA полимеразы I, которая зависит от ДНК-мурина. Спасение рекомбинантного штамма MACV Chicava (rMACV-Chicava) было достигнуто путем выражения генов белка и нуклеопротеина MACV Carvallo в трансформированных почках ребенка-хомяка (BHK-21). Мы описали умножение кинетики RMACV-Chicava в африканских зелёных обезьяньих эпителиальных клетках Vero, за которыми последовало определение фенотипа вирулентности в изверженных свиньях Хартли.Мы продемонстрировали, что умножение кинетики в клетках Vero, фенотип вирулентности у морских свиней и нейтрализация антителных титеров неразличимы между RMACV-Chicava и вирусом дикой природы. ЗАКЛЮЧЕНИЕ И ЗНАЧЕНИЕ: Мы делаем вывод о том, что RMACV-Чикава представляет собой полезную модель для изучения появления штаммов линии II МКАВ, а модель морских свиней полезна для разработки потенциальных вакцин и терапевтических антител для БХФ.
Название и аннотация на языке оригинала
Development and characterization of a reverse genetics system for the lineage II Chicava strain of Machupo virus in a guinea pig model.
BACKGROUND
Machupo virus (MACV) is a New World mammarenavirus (hereafter referred to as "arenavirus") and the etiologic agent of Bolivian hemorrhagic fever (BHF). No vaccine or antiviral therapy exists for BHF, which causes up to 35% mortality in humans. New World arenaviruses evolve separately in different locations. To date, up to eight lineages of MACV have been identified in Bolivia. While the prototype MACV Carvallo strain belongs to lineage I discovered in the Memore Province in the 1960s, the MACV lineage II strains have become the dominantly-circulating lineage in the same province since 1993.
METHODS
We report the development of a reverse genetics system for the MACV lineage II Chicava strain, using a pRF42 plasmid encoding the L and S segment genomic RNA under the transcriptional control of a murine DNA-dependent RNA polymerase I promoter sequence. Rescue of the recombinant MACV Chicava strain (rMACV-Chicava) was accomplished by expression of the L protein and nucleoprotein genes of the MACV Carvallo strain in trans in transfected baby hamster kidney (BHK-21) cells. We characterized the multiplication kinetics of rMACV-Chicava in African green monkey kidney epithelial Vero cells, followed by determining the virulence phenotype in outbred Hartley guinea pigs.
PRINCIPAL FINDINGS: We demonstrated that the multiplication kinetics in Vero cells, virulence phenotype in guinea pigs, and neutralizing antibody titers are indistinguishable between rMACV-Chicava and the wild-type parental virus.
CONCLUSION AND SIGNIFICANCE: We conclude that rMACV-Chicava provides a useful model system to investigate the emergence of MACV lineage II strains and the guinea pig model has utility for the development of candidate vaccines and therapeutic antibodies for BHF.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.