DOI 10.1007/978-1-0716-4256-6_30
Усиление филовирусных геномов из клинических образцов для последовательности следующего поколения.
Аннотация
Вирусная последовательность генома стала одним из важнейших инструментов смягчения последствий вспышек. В силу своего небольшого размера по отношению к геному хоста вирусные геномы составляют небольшую долю последовательности следующего поколения в клинических образцах при использовании беспристрастных последовательности. Длительная цепная реакция полимеразы облегчает амплификацию вирусных геномов из клинических и экологических образцов с минимальными грунтовыми участками, позволяя исследователям нацеливаться на регионы генома, которые сохраняются в рамках имеющихся вариантов. Здесь мы описываем усиление и последовательность генома вируса Эбола из образцов тканей, собранных из зараженных нечеловеческих приматов. Этот протокол облегчает полное восстановление вирусного генома с 103 медианных доз инфекции тканевой культуры на миллилитру.
Название и аннотация на языке оригинала
Amplification of Filovirus Genomes from Clinical Samples for Next Generation Sequencing.
Viral genome sequencing has become a critical tool in outbreak mitigation. Due to their small size relative to the host genome, viral genomes comprise a small fraction of next generation sequencing reads in clinical samples when using unbiased sequencing approaches. Long-range polymerase chain reaction facilitates the amplification of viral genomes from clinical and environmental samples with minimal primer sites, allowing researchers to target regions of the genome that are conserved across available variants. Here, we describe the amplification and sequencing of the Ebola virus genome from tissue samples collected from infected nonhuman primates. This protocol facilitates full viral genome recovery from as low as 103 median tissue culture infectious doses per milliliter.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.