KSHV ORF20 Interacts с Viral Probein Factory ORF59 и поощряет вирусную реактивацию.

После того как герпесвирус (KSHV) был связан с герпесом Капози, быстрое и широкомасштабное усиление вирусной ДНК (VDNA) приводит к значительной ядерной реорганизации. В рамках этого поразительного сдвига в ядерной архитектуре вирусные репродукционные отсеки формируются как места производства литических VDNA наряду с замечательной пространственной реконструкцией и релокацией клеточных и вирусных белков. В этих вирусных репликационных отсеках содержится несколько литических генопродуктов, которые координируют вирусное выражение генов, репликацию vDNA и сборку нуклеокапсидов. Виртуальные белки и механизмы, регулирующие этот пересмотр ядерного ландшафта во время репликации KSHV, остаются в значительной степени неизвестными. ORF20 KSHV — широко сохранившийся литический ген среди всех герпесвирусов, предполагающий, что он может иметь фундаментальный вклад в развитие герпесвирусной инфекции. Здесь мы использовали беспорядочный метод маркировки биотинной лиги для идентификации проксимального взаимодействия ORF20, который включает несколько вирусных белков, связанных с репликацией, одним из которых является ORF59, коэффициент процессивности ДНК KSHV. Используя анализы на коиммунополицию и иммунофлюоресценцию, мы подтвердили взаимодействие между ORF20 и ORF59 и отследили локализацию обоих белков в отсеках репликации KSHV. Чтобы еще больше охарактеризовать функцию ORF20, мы создали недефицитный KSHV ORF20 и сравнили его репликативную пригодность с вирусом диких типов. Производство Virion значительно сократилось в вирусе ОРФ20-дефицитного заболевания, что было отмечено супернатальными переносчиками. Кроме того, мы связали этот дефект в жизнеспособной формации вирионов с сокращением вирусного последующего генного экспрессии. И наконец, мы отметили общее сокращение числа случаев репликации VDNA в вирусе ОРФ20-дефицитного заболевания, что предполагает ключевую роль ОРФ20 в регулировании литического воспроизведения. В совокупности эти результаты отражают важнейшую роль KSHV ORF20 в развитии вирусной литической инфекции путем регулирования репликации VDNA наряду с другими важнейшими литическими белками в репродукционных средах KSHV. ВНЕШНИЙ герпес, связанный с Саркомой (KSHV) — герпесвирус, который вызывает пожизненную инфекцию, и поэтому его литикальное воспроизведение тщательно контролируется, с тем чтобы обеспечить эффективное распространение из его долгосрочного резервуара и распространение вируса на новые носители. Вирусное копирование ДНК включает в себя множество принимающих и вирусных белков, которые координируются как во времени, так и в пространстве для успешного продвижения через вирусный жизненный цикл. Однако этот процесс до сих пор не в полной мере понят. Мы изучили роль плохо описываемого вирусного белка ORF20, и с помощью маркировки близости мы обнаружили, что ORF20 взаимодействует с ORF59 в репродукционных отсеках и влияет на копирование ДНК и последующие этапы последнего вирусного жизненного цикла. В совокупности эти результаты дают представление о возможном вкладе ОРФ20 в сложный процесс репродукции литических ДНК и позволяют предположить, что этот высокоохранный белок может быть важным модулятором этого ключевого вирусного механизма.