BioTechniques · 1991
An improved preparation and purification of oligonucleotide-alkaline phosphatase conjugates.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Farmar J G, Castaneda M
Аннотация
A simple, low-cost protocol giving good yields of oligonucleotide-alkaline phosphatase conjugates on a 7-nmol or a 35-nmol scale of oligomer has been developed. The cross-linking agent is disuccinimidyl suberate. n-Butanol is used to remove excess disuccinimidyl suberate and side products away from the disuccinimidyl suberate/oligomer adduct before alkaline phosphatase is added directly to the dried adduct. The crude conjugate is purified in one step using a DEAE HPLC column and an NaCl gradient. These conjugates were used to detect 0.4 pg of a hepatitis B virus sequence using a chemiluminescent assay.