MedElevator
Войти в исследования Cell reports methods · 2023
Rapid and sensitive one-tube detection of mpox virus using RPA-coupled CRISPR-Cas12 assay.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Zhao Fei, Hu Yamei, Fan Zhangling, Huang Baoying, Wei Liang, Xie Yu, Huang Yu, Mei Shan, Wang Liming, Wang Lingwa, Ai Bin, Fang Jugao, Liang Chen, Xu Fengwen, Tan Wenjie, Guo Fei
Аннотация
Mpox is caused by a zoonotic virus belonging to the Orthopoxvirus genus and the Poxviridae family. In this study, we develop a recombinase polymerase amplification (RPA)-coupled CRISPR-Cas12a detection assay for the mpox virus. We design and test a series of CRISPR-derived RNAs(crRNAs) targeting the conserved D6R and E9L genes for orthopoxvirus and the unique N3R and N4R genes for mpox viruses. D6R crRNA-1 exhibits the most robust activity in detecting orthopoxviruses, and N4R crRNA-2 is able to distinguish the mpox virus from other orthopoxviruses. The Cas12a/crRNA assay alone presents a detection limit of 108 copies of viral DNA, whereas coupling RPA increases the detection limit to 1-10 copies. The one-tube RPA-Cas12a assay can, therefore, detect viral DNA as low as 1 copy within 30 min and holds the promise of providing point-of-care detection for mpox viral infection.