DOI 10.1016/j.jviromet.2012.09.024
Характеристика энтеровируса 71 капсида с использованием подэлемента белкового поликлонного антитела.
Аннотация
Enterovirus 71 (EV71), член рода Enterovirus семейства Picornaviridae, является одним из основных причинно-следственных заболеваний ручных ног и яичников (HFMD), широко распространенных в Азиатско-Тихоокеанском регионе. В этой статье был использован набор антител, специфичных на белки, для характеристики структурной белковой обработки EV71 и для определения состава и сборки капсидов EV71. Анализ ПБВ-ПАГЕ и западного пятна показал, что капсиды очищенной продукции EV71, в которой не было вирусной инфекции, состояли из обработанных VP0, VP1 и VP3, все из которых были объединены в частицы. Анализ инфекционного лизата EV71, содержащего клетки, показал наличие VP2, в дополнение к VP0, VP1 и VP3, что предполагает, что разрыв VP0 в VP2 и VP4 имеет важное значение для инфицированности. Иммунофлуорсенсивное пятно с тремя конкретными антителами показало, что белки капсида были совместно локализованы в цитоплазме клеток, инфицированных EV71. В результате была добавлена новая информация о переработке, сборке и локализации белков EV71 Capsid, а также продемонстрирована полезность антител капсидского белка для вирологических исследований и разработки вакцин и диагностических реагентов.
Название и аннотация на языке оригинала
Characterization of enterovirus 71 capsids using subunit protein-specific polyclonal antibodies.
Enterovirus 71 (EV71), a member of the Enterovirus genus of the Picornaviridae family, is one of the major causative agents of hand-foot-and-mouth disease (HFMD), which is prevalent in the Asia-Pacific region. In this article, a set of capsid subunit protein-specific antibodies was used to characterize the EV71 structural protein processing and to determine the composition and assembly of EV71 capsids. SDS-PAGE and Western blot analyses showed that the capsids of a purified EV71 preparation, which lacked viral infectivity, were composed of processed VP0, VP1 and VP3, all of which co-assembled into particles. Analyses of infectious EV71-containing cell lysate revealed the presence of VP2, in addition to VP0, VP1 and VP3, suggesting that the cleavage of VP0 into VP2 and VP4 is important for infectivity. Immunofluorescent staining with the three specific antibodies demonstrated that the capsid subunit proteins co-localized in the cytoplasm of cells infected with EV71. The results add new information on the processing, assembly and localization of EV71 capsid proteins, and demonstrate the usefulness of the capsid protein-specific antibodies for virological investigation and for development of vaccines and diagnostic reagents.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.