HBx взаимодействует с принимающим белком YBX3 и перерегулирует его выражение для эффективного воспроизведения вирусов гепатита B.

ЦЕЛЬ

Хронический гепатит В (ХГБ) по-прежнему является одной из глобальных проблем в области здравоохранения, и определение точного взаимодействия между вирусом и призраком, которое поддерживает вирусный жизненный цикл, имеет важнейшее значение для разработки терапевтических стратегий следующего поколения. В этом исследовании мы идентифицируем фактор носителя YBX3 (Y-box, связывающий белок 3) в качестве важнейшего требования для эффективного воспроизведения вируса гепатита B (ГБВ). Используя масс-спектрометрию с иммунопреобразованием, мы определили YBX3 как новый интерфейс белка регулирования ГБВ, HBx. Это взаимодействие было подтверждено с помощью совместного иммунно-восстановительного механизма. Функциональная роль YBX3 была охарактеризована с использованием CRISPR/Cas9-посредованного нокаута в клетках HepG2-hNTCP, за которым последовали эксперименты по генетическому спасению. Вирусная пригодность оценивалась путем количественной оценки ccDNA, pgRNA, HBsAg, HBEAg и внеклеточной ДНК HBV. Для определения распределения YBX3 и HBx использовалась подклеточная фракция.

Результаты

YBX3 непосредственно взаимодействует с HBx через свой C-терминальный домен. Генетическая абляция репродукции YBX3 сильно повреждена, что привело к значительному сокращению вирусной ДНК, HBEAg и HBsAg — фенотипа, который значительно перевернулся на повторное выражение YBX3. Подклеточная фракция подтвердила, что оба белка являются преимущественно ядерными и что выражение HBx регулирует избыток YBX3 как в ядерных, так и в цитоплазмических фракциях. Уровни YBX3 mRNA и белка значительно повысились во время активной инфекции ГБВ, что говорит о провирусной обратной связи.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

YBX3 является новым производным фактором, который стимулирует эффективное воспроизведение HBV путем привязки к HBx. Такое взаимодействие, вероятно, поддерживает важные ядерные функции HBx, которые имеют жизненно важное значение для эффективного воспроизведения вирусов. В этих выводах указывается, что " YBX3 " является одной из важнейших новых целей в области развития антивирусной терапии.