DOI 10.1371/journal.ppat.1011529
Для репликации генома требуется тромбинная декольте вируса гепатита Е в нескольких сохранённых местах.
Аннотация
Геномы вирусов РНК с положительной динамикой кодируют полипротеины, которые необходимы для мультипликации вирусов. Эти вирусные полипротеины должны подвергаться протеолизу (называемому также полипротеиновой переработкой) для создания функциональных белковых единиц. Этот протеолиз может осуществляться с помощью вирусно кодированных выступов, а также с помощью клеточных выступов, и, как правило, считается ключевым шагом в регулировании вирусного воспроизведения. Вирус гепатита Е (ГЭМ) является одной из главных причин острого вирусного гепатита. Положительный геном РНК переводится для создания полипротеина, называемого pORF1, который необходим и достаточен для воспроизведения вирусного генома. Однако механизм полипротеиновой обработки ГЭМ еще предстоит определить. В этом исследовании мы стремились понять процесс обработки этого полипротеина и его роль в репликации вирусов с использованием сочетания экспериментов по переводу в vitro и субгеномических репликонов ГЭМ. Наши данные не свидетельствуют о наличии вирусно закодированного протеза или самопротеолитной активности, поскольку в результате перевода in vitro в основном образуются необработанные вирусные полипротеины-прекурсоры. Тем не менее, семь решетчатых участков в полипротеине (предлагаемых биоинформатическим анализом) восприимчивы к клеточному протезе, тромбину. Используя две субгеномические репликонные системы, мы показываем, что мутагенез этих сайтов предотвращает воспроизведение, равно как и фармакологические ингибиции серин протеза, включая тромбин. В целом, наши данные поддерживают модель, в которой ГЭМ использует хостинговые протезы для поддержки репликации и которая могла бы стать независимой от вирусно кодированного протеза для обработки полипротеинов.
Название и аннотация на языке оригинала
Thrombin cleavage of the hepatitis E virus polyprotein at multiple conserved locations is required for genome replication.
The genomes of positive-sense RNA viruses encode polyproteins that are essential for mediating viral replication. These viral polyproteins must undergo proteolysis (also termed polyprotein processing) to generate functional protein units. This proteolysis can be performed by virally-encoded proteases as well as host cellular proteases, and is generally believed to be a key step in regulating viral replication. Hepatitis E virus (HEV) is a leading cause of acute viral hepatitis. The positive-sense RNA genome is translated to generate a polyprotein, termed pORF1, which is necessary and sufficient for viral genome replication. However, the mechanism of polyprotein processing in HEV remains to be determined. In this study, we aimed to understand processing of this polyprotein and its role in viral replication using a combination of in vitro translation experiments and HEV sub-genomic replicons. Our data suggest no evidence for a virally-encoded protease or auto-proteolytic activity, as in vitro translation predominantly generates unprocessed viral polyprotein precursors. However, seven cleavage sites within the polyprotein (suggested by bioinformatic analysis) are susceptible to the host cellular protease, thrombin. Using two sub-genomic replicon systems, we demonstrate that mutagenesis of these sites prevents replication, as does pharmacological inhibition of serine proteases including thrombin. Overall, our data supports a model where HEV uses host proteases to support replication and could have evolved to be independent of a virally-encoded protease for polyprotein processing.
Предметные рубрики MeSH
Подготовка и перевод публикации
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Тип публикации указан по данным источника. Уровень доказательности автоматически не присваивается.