Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) · 2024
One-Step Reverse Transcriptase qPCR Method for Serum Hepatitis B Virus RNA Quantification.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Liu Shi, Zhou Bin, Shen Sheng, Sun Jian
Аннотация
In recent years, serum hepatitis B virus (HBV) RNA has been identified as a promising noninvasive surrogate biomarker of intrahepatic covalently closed circular DNA (cccDNA), detection of which requires an invasive liver biopsy in patients with chronic HBV infection. It is impractical to detect intrahepatic cccDNA as a routine diagnosis for chronic hepatitis B (CHB) patients in clinical management. Here, we describe a detailed protocol for serum HBV RNA quantification, which can reflect the activity of intrahepatic cccDNA. The procedure includes three major steps: (1) Simultaneous isolation of HBV DNA and RNA from patients' serum, (2) DNase I digestion for removing HBV DNA contamination, and (3) HBV RNA quantification by one-step reverse transcription qPCR.