Nature protocols · 2010
Production of glycoprotein-deleted rabies viruses for monosynaptic tracing and high-level gene expression in neurons.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Wickersham Ian R, Sullivan Heather A, Seung H Sebastian
Аннотация
Recombinant rabies viruses rendered replication-deficient by the deletion of their envelope glycoprotein gene are useful tools for neuroscientists, permitting (1) extraordinarily high transgene expression levels within neurons, (2) retrograde infection of projection neurons through their axon terminals, (3) targeted infection of genetically specified neurons and (4) monosynaptic tracing of neuronal inputs. Here we present a detailed protocol for the production of high-titer and high-purity viral stocks, from initial generation of infectious virus from cDNA through amplification on complementing cell lines, pseudotyping if desired, purification by ultracentrifugation and titering. The procedure requires 3-4 weeks to complete.