Future microbiology · 2019
A CRISPR/Cas9-based strategy to simultaneously inactivate the entire ALS gene family in Candida orthopsilosis.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Zoppo Marina, Luca Mariagrazia Di, Villarreal Santiago N, Poma Noemi, Barrasa M Inmaculada, Bottai Daria, Vyas Valmik K, Tavanti Arianna
Аннотация
Aim: In this study, the CRISPR gene-editing approach was used to simultaneously inactivate all three members of the ALS gene family in the opportunistic pathogen Candida orthopsilosis. Materials & methods: Using a single gRNA and repair template, CRISPR-edited clones were successfully generated in a one-step process in both C. orthopsilosis reference and clinical strains. Results: The phenotypic characterization of the ALS triple-edited strains revealed no impact on growth in liquid or solid media. However, pseudohyphal formation and the ability to adhere to human buccal epithelial cells were significantly decreased in triple-edited clones. Conclusion: Our CRISPR/Cas9 system is a powerful tool for simultaneous editing of fungal gene families, which greatly accelerates the generation of multiple gene-edited Candida strains. Data deposition: Nucleotide sequence data are available in the GenBank databases under the accession numbers MK875971, MK875972, MK875973, MK875974, MK875975, MK875976, MK875977.