Cell · 2020
Amplification-free detection of SARS-CoV-2 with CRISPR-Cas13a and mobile phone microscopy.
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Fozouni Parinaz, Son Sungmin, Díaz de León Derby María, Knott Gavin J, Gray Carley N, D'Ambrosio Michael V, Zhao Chunyu, Switz Neil A, Kumar G Renuka, Stephens Stephanie I, Boehm Daniela, Tsou Chia-Lin, Shu Jeffrey, Bhuiya Abdul, Armstrong Maxim, Harris Andrew R, Chen Pei-Yi, Osterloh Jeannette M, Meyer-Franke Anke, Joehnk Bastian, Walcott Keith, Sil Anita, Langelier Charles, Pollard Katherine S, Crawford Emily D, Puschnik Andreas S, Phelps Maira, Kistler Amy, DeRisi Joseph L, Doudna Jennifer A, Fletcher Daniel A, Ott Melanie
Аннотация
The December 2019 outbreak of a novel respiratory virus, SARS-CoV-2, has become an ongoing global pandemic due in part to the challenge of identifying symptomatic, asymptomatic, and pre-symptomatic carriers of the virus. CRISPR diagnostics can augment gold-standard PCR-based testing if they can be made rapid, portable, and accurate. Here, we report the development of an amplification-free CRISPR-Cas13a assay for direct detection of SARS-CoV-2 from nasal swab RNA that can be read with a mobile phone microscope. The assay achieved ∼100 copies/μL sensitivity in under 30 min of measurement time and accurately detected pre-extracted RNA from a set of positive clinical samples in under 5 min. We combined crRNAs targeting SARS-CoV-2 RNA to improve sensitivity and specificity and directly quantified viral load using enzyme kinetics. Integrated with a reader device based on a mobile phone, this assay has the potential to enable rapid, low-cost, point-of-care screening for SARS-CoV-2.