Methods in molecular biology (Clifton, N.J.) · 2024
Lipofection-Based Delivery of CRISPR/Cas9 Ribonucleoprotein for Gene Editing in Male Germline Stem Cells.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАНазвание и аннотация: Перевод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Obermeier Mariella, Rogiers Vera, Vanhaecke Tamara, Baert Yoni
Аннотация
Gene editing in the murine germline is a valuable approach to investigate germ cell maturation and generate mouse models. Several studies demonstrated that CRISPR/Cas9 alters the genome of cultured male mouse germline stem cells delivered by electroporation of plasmids. Recently, we showed proof-of-principle that gene knockout can be effectively targeted in mouse germline stem cells by lipofecting Cas9:gRNA ribonucleoproteins. In this protocol, we describe a simple, fast, and cheap workflow for gene editing via the lipofection of non-integrative ribonucleoproteins in murine male germline stem cells.