Nucleic acids research · 2000
Amplification of IgG VH and VL (Fab) from single human plasma cells and B cells.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоддержка правительства СШАПоддержка службы здравоохранения СШАНазвание и аннотация: Перевод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Coronella J A, Telleman P, Truong T D, Ylera F, Junghans R P
Аннотация
Amplification of human immunoglobulin has many potential applications such as analysis of clonality, isolation of immunogenic antigens and antigen-specific immunotherapy. Here we describe a method for amplification of human immunoglobulin heavy and light chains from single B lymphocytes or plasma cells. Cells are isolated by FACS, and Ig is amplified by semi-nested RT-PCR. The method is versatile, sensitive and reliable: it provides appropriately paired heavy and light chains, requiring as little as 2 days to produce amplified Fab DNA from human tissues.
Предметные рубрики MeSH
B-LymphocytesBase SequenceBreast NeoplasmsCell SeparationDNA PrimersEquipment ContaminationFemaleFlow CytometryHumansImmunoglobulin Fab FragmentsImmunoglobulin FragmentsImmunoglobulin GImmunoglobulin Heavy ChainsImmunoglobulin Variable RegionImmunoglobulin kappa-ChainsImmunoglobulin lambda-ChainsOrgan SpecificityPalatine TonsilPlasma CellsPolymerase Chain ReactionRNA, MessengerReproducibility of ResultsReverse Transcriptase Polymerase Chain ReactionSensitivity and SpecificitySequence AlignmentSubstrate SpecificityTime FactorsTumor Cells, Cultured