Studying the transcriptome and the proteome of cells is essential for gaining a detailed understanding of cellular behavior, development, drug action, and disease progression. Spatial biology emerges to advance our ability to study the expression of molecules within tissues while preserving their natural spatial context. These cutting-edge technologies enable the mapping of thousands of individual cells in their original environment by detecting the location and biological quantity of cellular contents, such as RNAs and proteins. Here, we present a protocol to combine spatial transcriptomics (
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
BACKGROUND: Exposure to chewing tobacco is a known health risk factor but has received less attention than smoking in global tobacco control efforts. As the evidence base linking chewing tobacco use to poor health grows, it is essential to closely track the changing use of chewing tobacco distinct from other forms of smokeless tobacco, as well as the estimated burden associated with its use. These data are essential to inform policy makers who seek to identify and avert the health burden associated with these dangerous products.
METHODS: We estimated the prevalence of chewing tobacco use and
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Virus-induced gene silencing (VIGS) is a powerful reverse genetics tool that enables the transient knockdown of gene expression in plants by exploiting their natural antiviral defense mechanisms. This chapter presents a detailed protocol for applying a Cowpea severe mosaic virus (CPSMV)-based VIGS system to study gene function in soybean (Glycine max), with a focus on symbiotic root nodulation. VIGS allows systemic silencing of target genes, making it especially valuable to study pathways involving systemic signaling. The protocol includes Agrobacterium-mediated propagation of CPSMV variants i
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The study of plant organogenesis presents significant challenges due to the small number of cells involved in its initial stages. Observing the initial cell divisions becomes increasingly challenging when transitioning from Arabidopsis thaliana (Arabidopsis) to other species. Lateral root (LR) initiation is an essential process for enhancing a plant's ability to access water and nutrients. In most cases, LR formation starts in the pericycle of the parent root, giving rise to a new meristem. Understanding the mechanisms coordinating LR development is important for improving plant resilience to
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Imaging has revolutionized phenotyping analysis by providing accurate documentation and records of observed phenotypes. Analyzing imaging data remains a major bottleneck in root phenotyping analysis. Advances in technology offer a plethora of analysis options at varying automation levels and price points, providing a reliable open-source pipeline for image analysis that delivers stable, reproducible results. Here, we discuss a maize seedling image analysis pipeline powered by open-source tools that enables rapid analysis of seedling root phenotypes. This image analysis pipeline uses Root Paint
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In situ mRNA hybridization, which relies on the complementarity between antisense riboprobes and specific RNA populations, was originally used on thin sections with colorimetric dyes to visualize mRNA distribution. The use of fluorescent probes and confocal imaging enabled whole-mount in situ hybridization (WISH) and 3D reconstruction of gene expression domains. Here, we present a versatile protocol based on microwave treatment that results in high and homogeneous hybridization yields. When used with a cell wall marker and tissue clearing, it enables simultaneous visualization of gene expressi
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
High-content cytometry is an important technique in clinical research, producing data that is rich and complex to analyze. The resulting clusters of cells must be profiled to determine their role and function and analyzed to identify changes in cell frequency or marker intensity. The heat map is the most suitable tool for presenting this information in a synthetic way. However, its construction must be adapted to the information and the objective. Here we describe the step-by-step construction of heat maps of marker intensity and cell frequency using Excel, Phantasus, or R, including the conve
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Iron (Fe) is involved in numerous key physiological processes due to its transfer or gain electron capacity. However, in excess, Fe is toxic to cells. The understanding of mechanisms governing its homeostasis requires imaging techniques capable of localizing and quantifying Fe and its redox state in situ. The Perls-DAB histochemical staining is a widely used method for visualizing Fe at a cellular level. Other advanced approaches, such as micro X-ray fluorescence and X-ray absorption near-edge structure spectroscopy, also provide information on the spatial distribution and oxidation state of F
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Molecular cloning by PCR amplification using a highly processive, high-fidelity DNA polymerase represents a robust and versatile technique for the precise manipulation of nucleic acid sequences. This approach enables the insertion, replacement, or modification of specific DNA fragments within a cloning vector, thereby generating an accurate copy of a gene or viral segment for downstream applications, such as protein expression, site-directed mutagenesis, and structural or functional analyses. The use of processive, high-fidelity polymerases significantly reduces the occurrence of base substitu
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The nonstructural protein 2 (nsP2) of chikungunya virus (CHIKV) is an essential cysteine protease involved in viral polyprotein processing and replication complex regulation. Biochemical and structural studies of nsP2 require the availability of highly pure and enzymatically active protein. In this chapter, we describe a straightforward protocol for the heterologous expression and purification of CHIKV nsP2 protease domain (nsP2pro) in Escherichia coli. The protein is expressed at low temperature as a His-tagged construct and purified under native conditions by immobilized metal ion affinity c
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In this protocol, we describe a PAGE-based assay to evaluate the steady-state kinetics of the nsP2 protease. Using a recombinant GFP-TRX fusion substrate containing the nsP3/4 cleavage site, proteolytic activity is monitored through the appearance of cleavage products resolved by SDS-PAGE. Detection is achieved by Coomassie blue staining or GFP fluorescence emission, followed by densitometric analysis to quantify product formation and calculate initial reaction rates. The protocol provides a robust and accessible method for comparing enzyme activity under varying conditions, and is suitable fo
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chikungunya virus, a mosquito-borne alphavirus, poses a significant global health threat due to its rapid spread and lack of approved antiviral therapies. The viral nonstructural protein 2 protease (nsP2p) plays a critical role in processing the viral polyprotein to produce key viral enzymes, making it an attractive target for drug development. In this study, we describe the expression and purification of recombinant CHIKV nsP2 protease and establish a robust fluorogenic assay to measure its enzymatic activity using the acc-CHIK15-dnp peptide substrate. The assay enables real-time monitoring o
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Epigenetic regulation provides a dynamic and reversible layer of gene control that functions independently of changes in DNA sequence, primarily mediated by DNA methylation, histone modifications, and higher-order chromatin organization. Aberrant epigenetic states contribute to a wide range of human diseases. However, conventional epigenetic therapies based on small-molecule inhibitors lack locus specificity and often cause global chromatin disturbances. The emergence of programmable epigenetic editing technologies has transformed the field by enabling targeted rewriting of chromatin states at
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cell-penetrating peptides (CPPs) provide a modular nonviral strategy for intracellular delivery of CRISPR/Cas9 components, particularly preassembled Cas9 ribonucleoprotein (RNP) complexes. This chapter summarizes key principles of CPP-mediated Cas9 RNP delivery, including noncovalent complexation and covalent CPP-Cas9 conjugation strategies. A representative protocol is provided for the preparation and evaluation of Cas9-K5 RNP, including in vitro uptake and reporter-editing assays, nucleofection-based functional controls, local intracranial delivery, immunofluorescence staining, and quantitat
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Cas9-guide RNA ribonucleoprotein (RNP) complexes are widely used for genome editing because they provide rapid, transient nuclease activity without introducing exogenous DNA into target cells. Efficient RNP delivery requires a highly purified, correctly folded Cas9 protein that is free of contaminating nucleases and small-molecule impurities. This chapter describes the expression of N-terminally His-tagged Cas9 from a pET28b vector in Escherichia coli Rosetta strains, followed by purification using Ni-NTA immobilized metal affinity chromatography (IMAC) and size exclusion chromatography (SEC)
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Botrytis cinerea, a notorious pathogenic fungus, leads to postharvest decay in horticultural crops and substantial economic losses, while the pathogenicity of B. cinerea is closely related to its structural characteristics and cellular homeostasis. Among the currently available techniques, fluorescence and ultrastructural observations serve as crucial tools for investigating subcellular structures and cellular events during B. cinerea growth. These techniques enable the monitoring of cell structural integrity, such as variations in the cell membrane and cell wall, as well as intracellular chan
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Botrytis cinerea causes gray mold across a wide range of crops and postharvest contexts. While integrated agronomic practices help, chemical fungicides are still often required, raising concerns about resistance development and environmental impact. Biological control agents (BCAs), particularly non-Saccharomyces yeasts, offer advantages such as simple nutritional needs, surface colonization potential, and lower risk of mycotoxin production. A robust, rapid, and cost-effective in vitro screening workflow is essential to identify promising BCAs that inhibit B. cinerea through fungistatic diffus
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Conventional treatments often face challenges such as the limited ability to penetrate the blood-brain barrier (BBB). The Doxorubicin-loaded graphene oxide/magnetite (DOX/GO/Fe3O4) nanocomplex offers a promising platform due to GO's high surface area and pH-sensitive release, and Fe3O4's magnetic properties. This protocol describes the methodology for evaluating the cytotoxicity of free DOX versus the DOX/GO/Fe3O4 nanocomplex in the A-172 glioblastoma cell line, followed by advanced bioinformatics analysis to identify gene networks and indirect pathways that enhance the nanomaterial's biocompa
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Lipases, enzymes with widespread presence in nature, have been known since the early nineteenth century when they were initially discovered in bacteria. The ongoing exploration of their characteristics has fueled a growing body of research. This chapter provides a comprehensive overview of the primary origins, structural attributes, and diverse industrial uses of these extensively examined enzymes.
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Lipases (E.C. 3.1.1.3) are enzymes that catalyze the hydrolysis of triacylglycerols (TAGs) into glycerol and fatty acids (FAs), making them essential for various industrial applications, including food processing, detergents, pharmaceuticals, and biofuels. This chapter focuses on methods used to assess true lipase activity, specifically those for measuring the release of FAs from long-chain triglycerides with varying saturation levels (e.g., C8:0, C10:0, C12:0, C14:0, C16:0, C18:0, C18:1), as well as complex, standardized lipid substrates such as oils, mayonnaise, lipstick, sebum, beef fat, an
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.