Restriction fragment length polymorphism (RFLP) was the first reliable genetic marker used in plant molecular studies. It is a DNA-based marker that detects variation in DNA sequence at restriction enzyme sites and produces codominant, locus-specific markers that differentiate homologous and heterozygous genotypes. It provides greater accuracy than trait-based methods. The application of RFLP markers includes developing genetic linkage maps, conducting QTL analysis, characterizing germplasm, and detecting somaclonal variations. Despite being the availability of new molecular markers, RFLP stil
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Allergic reactions associated with arthropod bites are a growing concern worldwide. In particular, Alpha-Gal syndrome (AGS) is a red meat allergy associated with IgE antibodies against galactose-alpha-1,3-galactose (alpha-Gal) that is typically linked to tick bites, but other arthropods with alpha-Gal content may also induce allergic reactions. The AGS is underdiagnosed and thus important to evaluate the risks that may be associated with exposure to bites of arthropods with alpha-Gal. To approach this objective, herein are described the materials and methods for the detection of alpha-Gal cont
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Restriction fragment length polymorphism (RFLP) has been an important molecular tool in advancing cotton (Gossypium spp.) improvement by enabling researchers to detect stable genetic variations across the genome. Using restriction enzymes and labeled probes, RFLP generates highly reproducible, co-dominant markers that help identify differences among cultivars, wild species, and breeding lines. This technique has been widely used to construct early genetic linkage maps, locate quantitative trait loci (QTLS) associated with fiber quality, yield, and disease resistance, and study genome structure
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Sesame (Sesamum indicum L.) is an important oilseed crop with considerable agronomic potential, widely cultivated across tropical and subtropical regions. Despite its substantial economic value, genomic research in sesame has progressed more slowly than in major staple crops. The advent of high-throughput single-nucleotide polymorphism (SNP) markers has markedly advanced sesame breeding by enabling the development of dense genetic linkage maps, genome-wide association studies (GWAS), and marker-assisted selection (MAS). This chapter presents detailed protocols for SNP discovery and validation
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Chromatin interactions between cis-regulatory elements, especially enhancer-promoter interactions, are known to regulate the spatiotemporal dynamics of gene expression. Chromosome conformation capture (3C)-based methods can detect these interactions. Nicking enzyme-assisted open chromatin interaction capture (NicE-C) is a method we developed that leverages nicking enzyme-mediated open chromatin profiling with chromosome conformation capture to identify chromatin interactions specifically within open chromatin regions. This approach offers high efficiency, high resolution, low sequencing depth,
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Long noncoding RNAs (lncRNAs) have emerged as significant regulators of many physiological and pathological processes and play a key role in the onset and progression of a variety of diseases, including cancer. Currently, the functions of the majority of lncRNAs in carcinogenesis are still unclear. Functional characterization of specific lncRNAs is often challenging using the conventional RNA interference method, due to their specific and restricted subcellular localization. Antisense locked nucleic acid (LNA) GapmeRs, which induce RNase H1-mediated RNA cleavage, provide a promising strategy t
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
This chapter describes a standardized experimental protocol to induce and analyze galactose-α-1,3-galactose (α-Gal)-specific IgE responses in α-Gal-deficient (α1,3-galactosyltransferase knockout) mice. The absence of endogenous α-Gal in this model enables controlled sensitization to exogenous α-Gal-containing antigens from microbial, arthropod, and mammalian sources. The protocol integrates sequential oral exposure to α-Gal-expressing Escherichia coli O86:B7, capsule-based infestation with Ixodes ricinus nymphs, oral administration of porcine tissue homogenate, and subcutaneous injection of ti
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Candida tropicalis is a nonconventional yeast with biotechnological applications based on its capacity to produce sweeteners, biofuels, enzymes, and polysaccharides from the assimilation of different carbon sources. The biotechnological advantages are dependent on its metabolism, which can be preserved avoiding genotypic or phenotypic changes through cryopreservation. Hence, the protocols needed to carry out the cryopreservation of C. tropicalis (Castellani) Berkhout 750™ obtained from the KWIK-STIK™ are described. KWIK-STIK™ provides lyophilized microorganisms useful as control strains at the
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
RNA helicases are essential in all aspects of RNA biology where they remodel RNA secondary structures and RNA-protein (RNP) complexes. DEAD-box RNA helicases represent the largest RNA helicase family in eukaryotes. However, identification of biological targets for such helicases has been challenging. Structural probing methods involving treatment of cells with reagents such as SHAPE or dimethyl sulfate (DMS) coupled with sequencing (seq) have now enabled identification of RNA targets for these enzymes. These methods require extensive bioinformatics to derive RNA secondary structure predictions
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
R-loops are noncanonical nucleic acid structures formed by an RNA:DNA heteroduplex, presumably arising by the pairing of the nascent RNA to its own DNA template and the subsequent extrusion of a single DNA strand. Such structures, previously thought to be rare and mostly by-products of transcription, are today recognized as physiological intermediates of several molecular processes and to form at much higher rates than anticipated. R-loop levels must be meticulously controlled, as they can lead to DNA damage and genome instability. RNA remodeling, in particular, constitutes a central mechanism
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In many instances, the RNA sequences or motifs that constitute optimal or physiological substrates for a given RNA helicase are unknown or difficult to identify. In this chapter, we describe a recent methodology, Helicase-induced Selection of Ligands by Exponential enrichment (Helicase-SELEX), which allows the global identification of catalytically productive substrates for a RNA helicase from a large library of nucleic acid sequences. We explain how to use the methodology to identify Rut (Rho utilization) sequences in bacterial genomes, which likely encode the physiological RNA targets used b
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
RNA helicases play a critical role in RNA biogenesis by modulating RNA-protein interactions in an ATP-dependent manner. Although many RNA helicases function by unwinding RNA secondary structures or displacing proteins from RNA, a subset of RNA helicases facilitates the loading of their interacting proteins onto RNA. Here, I present an in vitro method for analyzing the formation of the uridine-rich small nuclear RNA (U snRNA) export complex, for which the involvement of RNA helicases was previously unknown. This method can be used to determine whether complex formation is ATP-dependent and iden
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Quantitating the binding of oligomeric proteins to RNA is not always straightforward with standard biochemical approaches such as the Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA). Here, we detail how we use a simple, alternative approach based on sample filtering through stacked nitrocellulose and positively charged nylon membranes to measure the affinity of the hexameric transcription termination factor Rho for RNA. The method is quick and easy to implement and should be useful to study the interaction of other RNA-binding proteins using RNA substrates bearing a 32P or fluorescent label.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The interaction of RNA helicases and non-canonical G-rich quadruplex (G4) structures in all aspects of RNA metabolism is a rapidly expanding field of study. Both cellular and viral RNA helicases dynamically maintain and disrupt G4 RNA structures in multiple compartments of the cell for efficient trafficking, transcription, splicing, translation, and, in the case of viral RNA genomes, replication. The conserved domains shared by diverse members of the helicase superfamilies for RNA binding and ATP-mediated duplex unwinding suggest that quadruplex disruption is a critical activity for many helic
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
RNA helicases are RNA-binding enzymes that remodel RNA structures and ribonucleoprotein complexes through regulated conformational changes. Their RecA-like catalytic cores cooperate with auxiliary domains, many of which contain flexible or partially disordered regions whose rearrangements are difficult to characterize using static structural methods. Hydrogen-deuterium exchange mass spectrometry (HDX-MS) overcomes this limitation by examining protein conformation in solution, providing peptide-resolved information on local stability, dynamics, and ligand-dependent structural changes. In this c
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Single-molecule manipulation methods are useful techniques to probe the interactions of proteins and nucleic acid structures. Here, we describe magnetic tweezers-based single-molecule investigation of the binding of helicases to G-quadruplex structures and their ATP-dependent unwinding activity, using DHX36 (also known as RHAU and G4R1) helicase and both DNA and RNA G-quadruplex structures as examples. We specifically emphasize the principle and method to probe the interactions between DHX36 and the DNA G-quadruplex in different intermediate states during an ATPase cycle of DHX36, based on det
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
RNA helicase DHX9 is a multi-functional protein governing transcriptional modulation, RNA processing, R-loop balance, and genome stability. SUMOylation is a post-translational modification that adds a critical regulatory layer to protein function by diversifying subcellular localization, stability, enzymatic activity, and protein-protein interactions. This protocol describes a basic but detailed approach for the analysis of DHX9 SUMOylation. We demonstrate that accurate site identification, specifically at Lysine 120 (K120), is the prerequisite for defining the molecular mechanism of this modi
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Ribonucleases can cleave RNAs internally in endoribonucleolytic mode or remove one nucleotide at a time from either the 5' or 3' end through exoribonuclease action. To show the direct implication of an RNase in a specific pathway of RNA maturation or decay requires the setting up of in vitro assays with purified enzymes and substrates. This chapter complements the previous Chap. 24 on assays of ribonuclease action in vivo by providing detailed protocols for the assay of B. subtilis RNases with prepared substrates in vitro.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
DEAD-box RNA helicases are widespread ATP-driven enzymes that reshape RNA structures and RNA-protein complexes during many steps of RNA metabolism. In bacteria, DEAD-box RNA helicases support cellular growth and responses to stress by contributing to ribosome biogenesis, RNA degradation, and translation initiation. Growing evidence indicates that several DEAD-box RNA helicases can also form liquid-liquid phase-separated condensates that concentrate RNA and partner proteins. This behavior adds a new layer of control to RNA regulation, although the molecular factors that promote or tune liquid-l
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Ribonucleases remodel RNAs to render them functional or to initiate their degradation. Our laboratory studies these pathways in detail using a variety of techniques, ranging from the isolation of RNAs in various RNase mutants to determine their implication in maturation or decay pathways by Northern blot, to proving their direct roles in RNA cleavage reactions using purified enzymes and in vitro-transcribed RNA. In this chapter, we provide in-depth protocols for the techniques we regularly use in the laboratory to assay RNase activity in vivo, with detailed notes on optimization of these metho
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.