Fast-dissociating, highly specific monoclonal antibodies (FDSAs) are single-molecule imaging probes useful for many biological assays including consecutive, multiplexable super-resolution microscopy. We developed a screening assay to characterize the kinetics of antibody-antigen interactions using single-molecule microscopy and established a pipeline to identify FDSAs from thousands of monoclonal candidates. Provided here are detailed protocols to prepare multi-well glass-bottom plates necessary for our assay to identify hybridoma clones secreting FDSAs. Synthesis of fluorescently labeled Fab
СтатьяResearch Support, N.I.H., IntramuralПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
In order to produce valuable monoclonal antibodies for immunodiagnosis of cysticercosis, hybridoma technique was adopted using the fusion of splenic lymphocytes from BALB/c mice immunized with Cysticercus cellulosae antigens and the myeloma cell line NS-1. Through screening and cloning, three monoclonal antibody cell lines have been established. Immunoglobulin subclasses of 3 lines were determined to be IgG1. These monoclonal antibodies were found to be highly specific and without cross reaction with Echinococcus granulosus hydatid cyst and Cysticercus fasciolasis. Antigen fractions specifical
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Sj23, the 23-kDa target antigen in Schistosoma japonicum adult worms of the hybridoma monoclonal antibody (mAb) I-134, has been identified and cloned from cDNA libraries, mAb I-134 has been successfully used in immunodiagnostic assays to detect S. japonicum infection in Philippine patients. Sequence analysis has shown that Sj23 is the homologue, with 84% amino acid identity, of Sm23, a 23-kDa molecule from S. mansoni worms previously described from our laboratory. The domain structures of Sj23 and Sm23 are strikingly similar to the human membrane proteins ME491, CD37, CD53 and TAPA-1, which ma
Сравнительное исследованиеСтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
One idiotype family 4.6.3 derived from a human hybridoma IgML monoclonal anti-DNA antibody of normal origin is commonly expressed (approximately 85%) in the serum of patients with systemic lupus erythematosus but not in normal controls, where its level appears to fluctuate with clinical disease activity. In contrast, the IgM released by normal cultured lymphocytes in vitro expresses this idiotype family but does not bind DNA. Both idiotype 4.6.3 and anti-DNA antibodies are frequently detectable in the serum of patients with monoclonal IgM but not IgG. Therefore, it is likely that idiotype 4.6.
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
A simple method has been established for tritium labeling immunoglobulins. This label avoids certain disadvantages of 125iodine such as high radiation hazard and requirement for frequent labeling owing to the short half-life of this isotope. High specific activities (range 1.8-9.0 cpm/mu g protein) were obtained with no loss of functional activity as demonstrated by passive hemagglutination. The labeled conjugate is especially suitable for detection of activity in hybridoma supernatants by indirect binding assay. Adapted to microtiter plates, the method is suitable for large numbers of samples
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
BACKGROUND: Detecting programmed death-ligand 1 (PD-L1) expression helps identify patients likely to respond to PD-1/PD-L1 therapies. However, the high costs of PD-L1 assays, such as SP263 pharmDx, limit their widespread use, creating a need for cost-effective alternatives. This study evaluates the analytical performance and concordance of the newly developed 3E2 PD-L1 antibody with established clones in lung adenocarcinoma (LUAD).
METHODS: The 3E2 monoclonal antibody was developed using the hybridoma technique. Its performance was compared with that of the SP263, Cell Signaling Technology (C
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Medium osmolality increases with pCO2 at constant pH. Elevated pCO2 and osmolality inhibit hybridoma growth to similar extents in both serum-containing and serum-free media. The combination of osmolality and elevated pCO2 synergizes to negatively impact cell growth. IgG2a glycosylation by hybridoma cells was evaluated under elevated pCO2 (to 250 mmHg pCO2) and/or osmolality (to 476 mOsm/kg). IgG2a site occupancy did not change significantly under any of the conditions studied, which is consistent with the robust glycosylation of other antibodies produced under various environmental stresses. H
Сравнительное исследованиеСтатьяПоддержка правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
It is now well documented that apoptosis represents the prevalent mode of death in lymphoid cultures and occurs spontaneously in late-expone … of NS/0 myelomas and splenocytes for the generation of hybridoma cells. Furthermore, the resulting hybridomas, although expressing E1B-19K at levels comparable to the myeloma parent, were no longer resistant to apoptosis. This indicates that the ability of E1B-19K to prevent apoptosis is not only dose-dependent but also seems to be cell-type dependent.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Immune interactions in the heart were studied using a murine model of myosin-induced autoimmune myocarditis. A T cell hybridoma specific for mouse cardiac myosin was generated from A/J mice and used to demonstrate that endogenous myosin/I-Ak complexes are constitutively expressed on antigen-presenting cells in the heart. This T cell hybridoma, Seu.5, was used as a functional probe to identify a myocarditis-inducing epitope of cardiac myosin. Overlapping peptides based on the cardiac myosin heavy chain alpha (myhc alpha) sequences were synthesized and tested for their ability to stimulate Seu.5
Сравнительное исследованиеСтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recent examples of immune responses directed against the synthetic polymer poly(ethylene glycol) (PEG) have led to the development of biocompatible polymers, which are viewed as promising candidates to act as surrogate materials for use in biological applications, such as hydrophilic poly(2-oxazoline)s (POx). Despite this, the characterization of critical aspects of the immune response against these emerging materials is sparse, in part because no known monoclonal antibodies (mAbs) against this family of synthetic material have been reported. To advance the understanding of such responses, we
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Gene-based delivery of recombinant antibody genes is a promising therapeutic strategy offering numerous advantages including sustained antibody levels, better safety profile and lower production cost. Here we describe generation of a recombinant antibody Fc-9E2 comprising a fusion protein between human Fc of IgG1 and a single-chain Fv derived from a hybridoma 9E2 secreting a mAb neutralizing West Nile virus (WNV). Fc-9E2 was shown to retain parental mAb's specificity and WNV-neutralizing capacity. Adenovirus-mediated in vivo delivery of the antibody gene resulted in sustained Fc-9E2 serum leve
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Hybridoma lines producing anti-idiotypic monoclonal antibodies (AImAbs) were prepared by fusing splenocytes of mice immunized with alpha-latrotoxin (LT) and P3-X63Ag8.653 myeloma line cells. AImAbs (1) bind to the rat brain synaptosomes, (2) do not affect the LT binding to the high-affinity receptor, and (3) do not react with LT in solution. The effect of AImAbs on the LT-induced 45Ca2+ influx into rat brain synaptosomes was studied. Some antibodies (6.6D11 and 11.7B7) were found to strongly inhibit this process. The result obtained indicate that the presynaptic membrane contains unidentified
Аннотация на английскомСтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
A mouse monoclonal antibody, H3a, directed against the newly described epidermolysis bullosa acquisita (EBA) antigen was obtained using hybridoma techniques. The distribution of the monoclonal antibody is identical to that of the polyclonal serum antibody of patients with EBA. By immunofluorescence, a linear band is seen at the dermal-epidermal junction and, by immunoelectron microscopy, immune reaction products are present in the lamina densa and sublamina densa regions. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis followed by Western immunoblot analysis shows that the monoclonal
СтатьяПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recent experiments have indicated that it is possible to uncover new antigens within both the basement membrane zone and the epidermis of normal adult human skin by producing murine anti-human monoclonal antibodies following immunization with human skin preparations. Already one such monoclonal antibody has defined a biochemical defect that may be important in the pathogenesis of one of the more severe blistering skin diseases, dystrophic epidermolysis bullosa. It is likely that further attempts at hybridoma production using basement membrane extracts of skin will lead not only to the identifi
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
OBJECTIVE: To develop monoclonal antibodies that can specifically recognize human von Willebrand factor (VWF) propeptide (VWFpp) in plasma, and establish a rapid and reliable method for the detection of VWFpp antigen in plasma by using the double-antibody sandwich ELISA with the obtained anti-VWFpp monoclonal antibody.
METHODS: The recombinant human VWFpp (D1 and D2 regions) protein expressed in eukaryotic cells was used as immunogen to immunize BALB/c mice with routine method, so as to obtain clones of fusion cells. After screening and identification, hybridoma cell lines secreting monoclona
Аннотация на английскомСтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Influenza C virus is an important respiratory pathogen not only infecting people, but also pigs, dogs, and other animals. Polymerase is central to the replication of influenza C virus and is an important target for studying the mechanism of viral replication. However, there is no commercial monoclonal antibody (MAb) targeting influenza C virus polymerase, which hampers the development of relevant research to some extent. In order to prepare MAb targeting the polymerase basic protein 2 (PB2) of influenza C virus, influenza C virus RNA-dependent RNA polymerase (RdRp, consists of PB1, PB2 and P3)
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
SALL4 transcription factor plays an important role to maintain the pluripotent and self-renewal of embryonic stem cells. It contributes to the growth of many cancers and embryonic development. With the exception of spermatogonia, SALL4 expression is silenced in most adult tissues after birth; nevertheless, it is re-expressed in a subset of different solid malignancies. SALL4 is a new, precise biomarker for testicular germ cell cancers that was just introduced. The whole isoform of SALL4 is called SALL4-A. Regarding the lack of antibody against human SALL4 isoforms, the pattern of expression, t
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
A hybridoma producing monoclonal rat IgE antibodies of antidinitrophenyl (anti-DNP) specificity was generated by fusion of Sp2/0-Ag 14 (SP2) mouse myeloma cells and spleen cells from a DNP-Ascaris-sensitized Brown-Norway rat. Subsequently, the supernatant of the hybridoma (FE-3) was applied to an affinity column of DNP-bovine serum albumin-Sepharose 4B. The adsorbed protein fraction was pooled, concentrated, and further purified using Sephadex G-200. The molecular weight of the isolated protein was approximately 200,000 by SDS-PAGE, and the protein reacted with peroxidase (POD) mouse antirat m
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
During a screening for monoclonal antibodies (MAbs) to the microsporidian Encephalitozoon hellem, three murine hybridoma cell lines producing strong enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) reactivities were cloned twice, were designated C12, E9, and E11, and were found to secrete MAbs to the immunoglobulin M isotype. On subsequent ELISAs, the three MAbs reacted most strongly to E. hellem, and they reacted somewhat less to Encephalitozoon cuniculi and least to Nosema corneum, two other microsporidian species. The MAbs produced values of absorbance against microsporidia that were at least thre
СтатьяПоддержка службы здравоохранения СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The sensitivity and specificity of immune reactions have long been recognized. However, since the description of the monoclonal antibody technique certain technical hurdles have been overcome. Monoclonal antibody (mAb) technology allows far more precise understanding of the humoral immune response by allowing dissection of this response into its individual B-lymphocyte populations. Furthermore, the ability to select and expand a particular B-cell clone allows for production of unlimited amounts of a pure antibody "reagent." Each of these reagents may be readily used as a "probe" for its respec
Клиническое исследованиеСтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
MedElevator
Войти в исследования