Carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae (CRKP) poses a major public health threat due to high mortality and limited therapeutic options. Rapid and accurate detection of both species identity and resistance determinants is critical for clinical management. Here, we developed a dual-target recombinase polymerase amplification-CRISPR/Cas12a multiplex lateral flow assay (DRC-MLFA) for simultaneous detection of K. pneumoniae and blaKPC in a single reaction. This platform introduces a functionally differentiated dual-channel detection strategy, in which the K. pneumoniae signal is generated direc
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Avian metapneumovirus (aMPV) is the main etiological agent of turkey rhinotracheitis, causing respiratory distress and economic losses in turkeys. While its impact in broilers and laying hens is relatively limited, aMPV subtype C (aMPV/C) is an important pathogen in ducks and waterfowl, leading to respiratory distress and severe egg-drop syndrome. To overcome the limitations of current diagnostics, such as heavy reliance on laboratory infrastructure and prolonged turnaround times, we established a rapid detection assay integrating recombinase polymerase amplification (RPA) with CRISPR/Cas12a a
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
CRISPR-Cas12a holds great promise for molecular diagnostics and gene editing due to its sequence-specific DNA recognition and robust trans-cleavage activity, yet precise tuning of its nuclease activity remains challenging. Herein, we report a simple temperature-regulation strategy using cost-effective ssDNA blockers, that enable hybridize with crRNA functional motifs at low temperatures to block and suppress Cas12a activation, while thermal dissociation at elevated temperatures restores Cas12a activity to realize thermoregulation of Cas12a activity, enabling precise thermal switching within 5
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Atherosclerosis is a chronic vascular inflammatory disease, and mouse models are essential for studying its pathogenesis. The Cre/loxP technology has become the gold standard for cell-type-specific gene targeting. However, the rapid proliferation of Cre driver lines has made model selection increasingly challenging. In this review, we provide a practical guide to choosing appropriate Cre mouse models. We compare the two most common backgrounds (Apoe and Ldlr knockout) in terms of lipid profiles, inflammatory dynamics, dietary dependence, and suitability for studying metabolic comorbidities to
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Precise spatiotemporal control of CRISPR activity is central to both accurate gene editing and sensitive molecular diagnostics. However, current regulatory strategies are often sequence-specific, labor-intensive, and difficult to generalize. Here, we report a minimalist plug-and-play tactic: acylation of the repeat region (rRNA) of a split crRNA with photolabile groups. Because the modification is introduced post-synthesis and is independent of the spacer region (sRNA), every rRNA, regardless of its target sequence, can be activated by light irradiation alone, entirely eliminating the need for
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
BACKGROUND: Broad bean wilt virus 2 (BBWV2) is a major viral pathogen causing significant economic losses in vegetable production. Existing detection methods often lack the speed, sensitivity, or simplicity required for effective on-site field diagnosis. This study aimed to identify a novel BBWV2 isolate and develop a rapid, equipment-free visual detection method suitable for field applications.
RESULTS: A novel BBWV2 isolate (BBWV2-GZCa) was identified and characterized from pepper in Guizhou Province, China. We developed a one-step visual detection assay by integrating reverse transcription
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Conventional strategies for food species authentication are severely limited by intensive laboratory procedures and poor quantitative reliability in complex multispecies adulteration scenarios. Herein, a standardized, fully integrated, and lab-free PMMA-based centrifugal microfluidic chip biosensor platform was developed by combining micromachining technologies of UV lithography and microdevice bonding, enabling quantitative multispecies meat adulteration detection. Conserved nuclear genes of chicken, duck, pork, beef, mutton, and horseflesh were systematically selected and applied to enzymati
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Vibrio alginolyticus is a halophilic marine bacterium that threatens aquaculture and food safety. Rapid and reliable detection is vital for early intervention and outbreak prevention. Recombinase polymerase amplification (RPA) coupled with CRISPR/Cas12a offers a sensitive, specific, and isothermal alternative suitable for portable detection. We developed a one-tube RPA/Cas12a assay for rapid and sensitive V. alginolyticus detection, which integrates fluorescence and lateral flow strip (LFS) readouts for flexible visualization. An optimal primer pair (F1/R1) and crRNA2 targeting the toxR gene e
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Rapid and accurate detection of foodborne pathogens is essential to prevent outbreaks of foodborne illness and reduce public health threats. However, conventional diagnostic methods remain inadequate for on-site food safety monitoring due to low sensitivity, bulky equipment, and complex operation. Therefore, the development of portable, miniaturized, and user-friendly point-of-care testing systems has become essential. In this study, we report an all-in-one microfluidic centrifugal disc (AMCD) platform that integrates recombinase polymerase amplification (RPA) and CRISPR-Cas12a detection for r
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Early and accurate diagnosis of Alzheimer's disease (AD) remains a significant challenge due to the multifactorial and dynamic nature of its pathology. Although plasma-based biomarkers such as amyloid-β (Aβ) and phosphorylated tau (p-tau) have shown promise as diagnostic indicators, current single-biomarker detection techniques lack the requisite sensitivity and specificity for early-stage diagnosis. Here, we present the development of an ultrasensitive CRISPR-based multi-protein detection array (UCMDA) capable of concurrently detecting six core AD biomarkers, including Aβ40, Aβ42, p-tau181, p
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Waterfowl parvoviruses, including goose parvovirus and novel goose parvovirus, are highly transmissible pathogens that pose serious threats to flock health and the poultry industry. In this paper, we report a macromolecule-enabled recombinase polymerase amplification (RPA)-CRISPR/Cas13a platform for the rapid, sensitive, and field-deployable visual detection of these viruses by, targeting VP3. Guided by crRNA, LwaCas13a specifically recognizes complementary target RNA and is activated to exert non-specific collateral cleavage activity, efficiently degrading nearby single-stranded RNAs. Species
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Reliable molecular diagnosis at the point of care remains challenging owning to its dependence on specialized instrumentation and temperature control. However, clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) and the associated Cas12a protein have shown promise for point-of-care detection. Therefore, an engineered Cas12a variant from Lachnospiraceae bacterium, namely L.b. Cas12a Ultra, was developed. It exhibited markedly enhanced functional stability and low-temperature tolerance, maintaining robust activity across typical mushroom cultivation temperatures (21 °C-29 °C), com
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Bronchioalveolar stem cells (BASCs), located at the bronchioalveolar duct junction (BADJ), contribute to adult lung regeneration after injury, yet their role during postnatal lung morphogenesis remains poorly characterized. In this study, we showed that BASCs first emerged at birth and persisted throughout the postnatal saccular stage with stable localization and abundance. To trace their fate, we generated a SftpcDreER knock-in mouse and combined it with Scgb1a1CreER and dual-reporter H11LSL - ZsG_RSR-tdT mice to establish a dual recombinase-mediated lineage tracing system (BASC-Tracer). Usin
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recombinase polymerase amplification (RPA) enables isothermal nucleic acid detection. However, the key enzyme UvsX of RPA exhibits suboptimal efficiency at low-temperature conditions and low template concentration. Here, we employed a directed engineering strategy combining energy-based screening and protein language models (PLMs). Through semi rational design and iterative optimization with EVOLVEpro, we obtained a triple mutant, TIG (S233T/A311I/A341G), which achieved 1.89-fold RPA relative activity of the wild-type (WT) at a template concentration of 1 × 105 copies reaction-1, and showed hi
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
OBJECTIVE: Acinetobacter baumannii, a prevalent multidrug resistant (MDR) pathogen, poses a significant threat to critically ill patients. This work aims to analyze the genomes of eight clinical carbapenem-resistant A. baumannii (CRAB) strains, and to study the mechanisms and genomic context of antimicrobial resistance for this critical pathogen.
METHODS: Nanopore whole-genomic sequencing was performed and compared with carbapenem-susceptible A. baumannii strain to identify genomic context patterns of antibiotic resistance.
RESULTS: Although some of these strains contain transferable plasmid
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The global swine industry suffers substantial economic losses from Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus (PRRSV), which causes reproductive and respiratory disorders. With NADC30- and NADC34-like strains now predominant, differentiation is complicated by their similar biology, despite characteristic Nsp2 gene deletions of 131 aa and 100 aa, respectively, highlighting a need for improved diagnostics. Moving fundamentally beyond conventional broad-spectrum detection, this assay innovatively targets the characteristic Nsp2 deletion signatures. A diagnostic platform integrating CRISP
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
PURPOSE: MYO7A is involved in several forms of deafness in humans and mice, and in this study we aimed to investigate if the hearing loss could be reversed after its onset.
METHODS: A knockdown allele of Myo7a in the mouse, Myo7atm1a, was characterised by recording ABR thresholds at ages from 4 weeks to 6 months old and measuring the amount of hair cell degeneration at 4 weeks old. Scanning electron microscopy was used to assess the condition of stereocilia bundles. A tamoxifen-inducible Flp recombinase was used to activate expression of Myo7a in Myo7atm1a/tm1a homozygotes at 4 weeks old by e
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
INTRODUCTION: Invasive fungal infections (IFIs) caused by Candida albicans and Cryptococcus neoformans are associated with high mortality, necessitating rapid and accurate diagnostic tools for timely antifungal therapy.
METHODS: We developed and optimized a duplex real-time recombinase polymerase amplification (RPA) assay targeting the internal transcribed spacer (ITS) regions of both fungi. Analytical performance, including specificity, sensitivity, limit of detection (LOD), repeatability and reproducibility, was systematically evaluated. The assay's diagnostic applicability was assessed usi
СтатьяОценочное исследованиеПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Human norovirus (HuNoV) and hepatitis A virus (HAV) are highly prevalent and contagious foodborne pathogens that pose a significant threat to global public health. Current molecular detection methods such as RT-qPCR and RT-ddPCR are highly sensitive and specific but time-consuming, require specialized equipment, and are unsuitable for on-site detection. We developed a multiplex reverse transcription recombinase polymerase amplification (RT-RPA) assay coupled with CRISPR-Cas12a and lateral flow detection for rapid, simultaneous identification of HuNoV GI, GII, and HAV. Through rigorous in silic
СтатьяОценочное исследованиеПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Highly pathogenic airborne microorganisms pose a significant public health threat, particularly because their small particle size can support prolonged suspension and long-range transport. Here, we present an integrated platform that combines a composite bioaerosol collection system with a three-stage enrichment mechanism and recombinase polymerase amplification-CRISPR/Cas12a (RPA-CRISPR/Cas12a) detection. The platform incorporates model-based constant-temperature control, stacked optical filters, and multichannel fluorescence imaging. The temperature-control model accurately described the the
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.