Cholera toxin travels from the plasma membrane to the endoplasmic reticulum of host cells, where a portion of the toxin, the A1-chain, is unfolded and targeted to a protein-conducting channel for retrotranslocation to the cytosol. Unlike most retrotranslocation substrates, the A1-chain escapes degradation by the proteasome and refolds in the cytosol to induce disease. How this occurs remains poorly understood. Here, we show that an unstructured peptide appended to the N terminus of the A1-chain renders the toxin functionally inactive. Cleavage of the peptide extension prior to cell entry rescu
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The selective toxicity of depressant scorpion neurotoxins to insects is useful in studying the insect sodium channel gating, as well as being relevant to several other applications. In order to carry out structure/activity studies, the functional expression of such polypeptides is required. In the work reported here, the cDNA of a new peptide from the venom of the scorpion Buthotus saulcyi was cloned and sequenced. It codes for a 64 residues peptide (BsaulI) with 8 highly-conserved cysteines. This peptide shares high sequence similarity with depressant insect toxins of other scorpion species.
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recombinant human erythropoietin produced by mammalian cells contains about 40% carbohydrates which maintain its stability and long residence in body. However, mammalian derived Epo has low yields and high costs of production. In this article, a cost-effective strategy of producing non-glycosylated Epo from Escherichia coli and then PEGylating it to replace the role of sugar chains was investigated. Recombinant human non-glycosylated erythropoietin (rh-ngEpo) was overexpressed as inclusion body in E. coli. As the routine inclusion body washing step resulted in poor protein recovery and purity,
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Self-assembling ferritin nanoparticle technology is a widely used vaccine development platform for enhancing the efficacy of subunit vaccines by displaying multiple antigens on nanocages. The dengue virus (DENV) envelope domain III (EDIII) protein, the most promising antigen for DENV, has been applied in vaccine development, and it is essential to evaluate the relative immunogenicity of the EDIII protein and EDIII-conjugated ferritin to show the efficiency of the ferritin delivery system compared with EDIII. In this study, we optimized the conditions for the expression of the EDIII protein in
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Botulinum (BoNTs) and tetanus (TeNT) neurotoxins are the most toxic substances known and form the growing family of Clostridial neurotoxins (CNT), the etiologic agents of botulism and tetanus. CNT are composed of a metalloprotease light chain (L), linked via a disulfide bond to a heavy chain (H). H mediates the binding to nerve terminals and the membrane translocation of L into the cytosol, where its substrates, the three SNARE proteins, are localized. L translocation is accompanied by unfolding and, once delivered on the cytosolic side of the endosome membrane, it has to be reduced and reacqu
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Accumulation of amyloid-like aggregates is a hallmark of numerous neurodegenerative disorders such as Alzheimer's and polyglutamine disease. Yet, whether the amyloid inclusions found in these diseases are toxic or cytoprotective remains unclear. Various studies suggest that the toxic culprit in the amyloid folding pathway is actually a soluble oligomeric species which might interfere with normal cellular function by a multifactorial mechanism including aberrant protein-protein interactions. Molecular chaperones suppress toxicity of amyloidogenic proteins by inhibiting aggregation of non-native
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Occludin (OCLN) is a key integral membrane protein of tight junctions, essential for maintaining the blood-tissue barrier and serving as a critical co-receptor for Hepatitis C Virus entry. Its second extracellular loop (EL2) is a primary determinant of junctional permeability and viral tropism, yet its structural characterization has been hampered by the technical challenges of achieving native oxidative folding in vitro. In this study, we established a robust platform for the recombinant expression and purification of the human OCLN EL2 domain. By optimizing affinity tag placement and develop
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Monoclonal antibodies are essential tools in biological research, diagnostics, and therapeutics. While mammalian expression systems are widely used, microbial hosts such as Escherichia coli offer cost-effective and scalable production of antibody fragments but often yield inclusion bodies requiring refolding. In this study, we report a combined strategy using a translation-enhancing SKIK peptide tag and a leucine zipper-fused Fab format to improve expression in Escherichia coli, together with a continuous, dialysis-based automated refolding system. Compared with the conventional stepwise metho
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Significant efforts to develop both laboratory and field-based detection assays for an array of potential biological threats started well before the anthrax attacks of 2001 and have continued with renewed urgency following. While numerous assays and methods have been explored that are suitable for laboratory utilization, detection in the field is often complicated by requirements for functionality in austere environments, where limited cold-chain facilities exist. In an effort to overcome these assay limitations for Bacillus anthracis, one of the most recognizable threats, a series of single d
СтатьяПоддержка правительства СШАПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The mammalian prion protein can form infectious, nonnative, and protease resistant aggregates (PrPD), which cause lethal prion diseases like human Creutzfeldt-Jakob disease. PrPD seeds the formation of new infectious prions by interacting with and triggering the refolding of the normally soluble mammalian prion protein, PrPC, into more PrPD. Refolding of misfolded proteins in the cell is carried out by molecular chaperones such as Grp78. We have recently shown that Grp78 sensitizes PrPD to proteases, indicating structural alterations and leading to its degradation. However, the process of chap
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The vasopressin type 2 (V2R) receptor belongs to the class of G-protein coupled receptors. It is mainly expressed in the membrane of kidney tubules, where it is activated by the extracellular arginine vasopressin. In men, inactivating and activating mutations cause nephrogenic diabetes insipidus and the nephrogenic syndrome of inappropriate antidiuresis respectively. Like most GPCRs, V2R's third intracellular loop (V2R-i3) is involved in the binding and activation of its major effector, the GαS protein. We overexpressed the V2R₂₂₄₋₂₇₄ fragment corresponding to V2R-i3 as a fusion protein with t
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The E1 and E2 glycoproteins of Western Equine Encephalitis (WEE) are candidate antigens for WEE subunit vaccine development. We have cloned the E1 gene of WEE virus and expressed it in Escherichia coli as inclusion bodies. The inclusion bodies were successfully solubilised, refolded and the immunogenicity of this unglycosylated protein was assessed in mice. Immunization of mice with recombinant E1 protein generated both humoral and cell-mediated immune responses, indicating the recombinant E1 protein is immunogenic. Challenge of E1-immunized mice with live WEE virus demonstrated little or no p
Оценочное исследованиеСтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Systemic candidiasis is the fourth most common bloodstream infection in ICU patients worldwide. Although C. albicans is a predominant species causing systemic candidiasis, infections caused by non-albicans Candida (NAC) species are increasingly becoming more prevalent globally along with the emergence of drug resistance. The diagnosis of systemic candidiasis is difficult due to the absence of significant clinical symptoms in patients. We investigated the diagnostic potential of recombinant secreted aspartyl proteinase 2 (rSap2) from C. parapsilosis for the detection of Candida infection. The r
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Vacuolating cytotoxin A (VacA) is a highly polymorphic virulence protein produced by the human gastric pathogen Helicobacter pylori which can cause gastritis, peptic ulcer and gastric cancer. Here, we present an optimized protein preparation of the mature full-length VacA variants (m1-and m2-types) and their 33-kDa N-terminal and 55/59-kDa C-terminal domains as biologically active recombinant proteins fused with an N-terminal His(6) tag. All recombinant VacA constructs were over-expressed in Escherichia coli as insoluble inclusions which were soluble when phosphate buffer (pH 7.4) was suppleme
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
BACKGROUND: Molecular chaperones that support de novo folding of proteins under non stress condition are classified as chaperone 'foldases' that are distinct from chaperone' holdases' that provide high affinity binding platform for unfolded proteins and prevent their aggregation specifically under stress conditions. Ribosome, the cellular protein synthesis machine can act as a foldase chaperone that can bind unfolded proteins and release them in folding competent state. The peptidyl transferase center (PTC) located in the domain V of the 23S rRNA of Escherichia coli ribosome (bDV RNA) is the c
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
A mRNA transcript that codes for a phospholipase (PLA2) was isolated from a single venom gland of the Bothrops ammodytoides viper. The PLA2 transcript was cloned onto a pCR®2.1-TOPO vector and subsequently expressed heterologously in the E. coli strain M15, using the pQE30 vector. The recombinant phospholipase was named rBamPLA2_1, and is composed of an N-terminal fusion protein of 16 residues, along with 122 residues from the mature protein that includes 14 cysteines that form 7 disulfide bonds. Following bacterial expression, rBamPLA2_1 was obtained from inclusion bodies and extracted using
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recently Bekker et al. [Bekker G-J et al. Protein Sci. 2019;28:429-438.] described a computational strategy of applying molecular-dynamics simulations to estimate the relative stabilities of single-domain antibodies, and utilized their method to design changes with the aim of increasing the stability of a single-domain antibody with a known crystal structure. The structure from which they generated potentially stabilizing mutations is an anti-cholera toxin single domain antibody selected from a naïve library which has relatively low thermal stability, reflected by a melting point of 48°C. Thei
СтатьяПоддержка правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The function of the GM2 activator protein is to act as a substrate-specific cofactor in the hydrolysis of GM2 ganglioside by beta-hexosamini … We first compared the wild-type protein produced by two bacterial expression methods, one requiring protein refolding, with activator purified from the medium of transfected CHO cells. The "activity" and circular dichroism spectrum (alpha-helical content) of all three proteins were similar, justifying the use of refolded activator from transformed bacteria in struc …
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Single molecule techniques are particularly well suited for investigating the processes of protein folding and chaperone assistance. However, current assays provide only a limited perspective on the various ways in which the cellular environment can influence the folding pathway of a protein. In this study, a single molecule mechanical interrogation assay is developed and used to monitor protein unfolding and refolding within a cytosolic solution. This allows to test the cumulative topological effect of the cytoplasmic interactome on the folding process. The results reveal a stabilization agai
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The envelope glycoproteins of Rubella virus, E1 and E2, mediate cell tropism, and E1 in particular plays a pivotal role in the fusion of the virus with the endosomal membrane. Both are the prime targets of the humoral immune response. Recombinant variants of the E1 ectodomain as well as E1 antigen preparations from virus lysates are commonly used to detect anti-Rubella immunoglobulins in human sera. Hitherto, recombinant E1 for diagnostic applications has been produced chiefly in eukaryotic expression systems. Here, we report the high-yield overproduction of an engineered E1 ectodomain in the
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
MedElevator
Войти в исследования