Alcoholic liver injury is a major global public health concern at present. The ADAM9 gene plays a crucial role in the occurrence and development of various liver diseases, but its role in acute alcoholic liver injury remains ambiguous. In this study, a chimeric single-guide RNA targeting the genomic regions of mouse ADAM9 was designed using the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated protein 9 (Cas9) technology. Next, the role of ADAM9 in acute alcoholic liver injury in vitro in cultured mouse cells and in vivo in a hydrodynamic injection-based alco
СтатьяПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Targeted delivery of therapeutic proteins toward specific cells and across cell membranes remains major challenges. Here, we develop protein-based delivery systems utilizing detoxified single-chain bacterial toxins such as diphtheria toxin (DT) and botulinum neurotoxin (BoNT)-like toxin, BoNT/X, as carriers. The system can deliver large protein cargoes including Cas13a, CasRx, Cas9, and Cre recombinase into cells in a receptor-dependent manner, although delivery of ribonucleoproteins containing guide RNAs is not successful. Delivery of Cas13a and CasRx, together with guide RNA expression, redu
СтатьяПоддержка NIH: внешняя программаПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recent sequencing of numerous fungal species revealed large repertoires of putative biotechnologically relevant genes and secondary metabolite gene clusters. However, often the commercial potential of these species is impeded by difficulties to predict host physiological and metabolic compatibility with a given product, and lack of adequate genetic tools. Consequently, most heterologous production is performed in standard hosts where genetic tools and experience are in place. However, these species may not be suitable for all products. To increase chances of successful heterologous production,
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Staphylococcus aureus Cas9 (SaCas9) is an RNA-guided endonuclease that targets complementary DNA adjacent to a protospacer adjacent motif (PAM) for cleavage. Its small size facilitates in vivo delivery for genome editing in various organisms. Herein, using single-molecule and ensemble approaches, we systemically study the mechanism of SaCas9 underlying its interplay with DNA. We find that the DNA binding and cleavage of SaCas9 require complementarities of 6- and 18-bp of PAM-proximal DNA with guide RNA, respectively. These activities are mediated by two steady interactions among the ternary co
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Bananas are a staple food source and a major export commodity worldwide. The Cavendish dessert banana is a triploid AAA genome type and accounts for around 47% of global production. Being essentially sterile, genetic modification is perhaps the only pathway available to improve this cultivar. In this study, we used the CRISPR/Cas9 gene editing system to deliver a self-cleaving polycistronic guide RNA (gRNA) designed to target exon 1 of the Phytoene desaturase (PDS) gene in the Cavendish cultivar "Williams". Genotyping of 19 independent events showed a 100% PDS modification rate primarily in th
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The coronavirus disease 2019 (COVID-19) pandemic caused by severe acute respiratory syndrome-coronavirus-2 (SARS-CoV-2) and variants has led to significant mortality. We recently reported that an RNA-targeting CRISPR-Cas13 system, called prophylactic antiviral CRISPR in human cells (PAC-MAN), offered an antiviral strategy against SARS-CoV-2 and influenza A virus. Here, we expand in silico analysis to use PAC-MAN to target a broad spectrum of human- or livestock-infectious RNA viruses with high specificity, coverage, and predicted efficiency. Our analysis reveals that a minimal set of 14 CRISPR
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Robust expression of guide RNA (gRNA) is essential for successful implementation of CRISPR-Cas9 genome-editing methods. The gRNA components, such as an RNA polymerase promoter followed by the gRNA coding sequence and an RNA polymerase terminator sequence, and the Cas9 protein are expressed either via an all-in-one plasmid or separate dedicated plasmids. The preparation of such plasmids involves a laborious multi-day process of DNA assembly, bacterial cloning, validation, purification and sequencing. Our Circular Vector (CV) protocol introduces an efficient, fully synthetic, cell-free approach
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
While innovative, current CRISPR-Cas9 systems face safety concerns and practical hurdles, notably sequence-independent, noncanonical off-targeting. We demonstrate that the crRNA:tracrRNA duplex in guide RNAs (gRNA) is both splittable and reprogrammable. This property, however, enables endogenous RNAs with crRNA-like sequences to hijack any gRNAs, causing low-frequency yet pervasive tracrRNA-dependent off-target (TDO) effects. Using machine learning trained on high-throughput gRNA variant screens, we derive optimal gRNA-designing rules and engineer crRNA variants mismatched to the human/mouse t
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПолный текст не найденПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
CRISPR/Cas9 and auxin-degron systems represent two powerful and complementary genetic tools that have revolutionized cancer research. The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas (CRISPR-associated protein)-based gene editing system has been widely used in numerous biological fields, significantly enhancing the capacity of researchers to elucidate the underlying mechanisms of biological phenomena. The two most prevalent applications for CRISPR-mediated gene editing are knockout and knock-in. This protocol covers both single-gRNA (sgRNA) and dual-gRNA directed knoc
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
As programmable RNA-guided DNA nucleases found in eukaryotes, Fanzors have shown promise in genome editing with their compact size. A wide variety of RuvC-containing Fanzor nucleases have been identified in various eukaryotes and their viruses. However, low editing efficiency limits the application of Fanzor in mammalian genome editing. In this study, we introduce SpuFz1 V4, an engineered RNA-guided DNA endonuclease with vigorous editing activity in the human genome. Furthermore, we demonstrate the substantial potential of the Fanzor system as a base editor. SpuFz1 V4 is currently the most act
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Invasive species inflict major ecological, economic, and cultural harm worldwide, highlighting the urgent need for innovative control strategies. Genome editing offers exciting possibilities for targeted control methods for invasive species. Here, we demonstrate CRISPR-Cas9 genome editing in the cane toad (Rhinella marina), one of Australia's most notorious invasive species, by targeting the tyrosinase gene to produce albino phenotypes as visual markers for assessing editing efficiency. Microinjection of Cas9 protein and guide RNAs into one-cell zygotes resulted in 87.6% of mosaic larvae displ
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The rapid and accurate identification of parasites is crucial for prompt therapeutic intervention in parasitosis and effective epidemiological surveillance. For accurate and effective clinical diagnosis, it is imperative to develop a nucleic-acid-based diagnostic tool that combines the sensitivity and specificity of nucleic acid amplification tests (NAATs) with the speed, cost-effectiveness, and convenience of isothermal amplification methods. A new nucleic acid detection method, utilizing the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-associated (Cas) nuclease, holds p
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Among non-viral gene delivery vectors, poly(β-amino ester)s (PAEs) are one of the most versatile candidates because of their wide monomer availability, high polymer flexibility, and superior gene transfection performance both in vitro and in vivo. Over two decades, PAEs have evolved from linear to highly branched structures, significantly enhancing gene delivery efficacy. Building on the proven efficient sets of monomers in highly branched PAEs (HPAEs), this work introduced a new class of cyclic PAEs (CPAEs) constructed via an A2 + B4 + C2 cyclization synthesis strategy and identified their ma
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The CRISPR/Cas9 system, particularly the Cas9-sgRNA ribonucleoprotein (RNP) complex, offers a highly efficient platform for gene editing. However, traditional microinjection methods for RNP delivery in insect embryos are labor-intensive, technically demanding, and often reduce embryo viability, especially in species with fragile, microscopic embryos. In this study, a novel, non-invasive delivery method for the RNP complex in tiny insect embryos has been optimized. Whitefly, Bemisia tabaci, an invasive insect pest of agricultural importance and vector of plant diseases, was considered as a mode
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
The clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)-Cas9 system has become a powerful genome-editing tool that uses RNA-DNA pairing to cleave target DNA with protospacer adjacent motif (PAM) sequences. While its primary function is well-studied, secondary activities remain poorly understood, causing unintended off-target effects. This study reports for the first time that Cas9 specifically cleaves the 5' overhang of the non-target strand (NTS) in target double-stranded DNA. This specific cleavage requires an additional PAM element at the NTS 5' region, is mediated by Cas9's
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Split crRNA and split activator/target strategies have enhanced and advanced CRISPR-based diagnostics (CRISPR/Dx) by requiring a conditional assembly of components. The split crRNA involves dividing the guide RNA (crRNA) itself into multiple inactive fragments that only reassemble to become functional crRNA upon binding to a specific target. The split activator/target involves dividing the target or activator substrate into two reconfigurable segments that trigger Cas activation only upon proper assembly. These evolved CRISPR/Dx systems have enabled: direct quantification of miRNA and ultrasho
СтатьяОбзорПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
CRISPR-Cas systems can be utilized as programmable-spectrum antimicrobials to combat bacterial infections. However, how CRISPR nucleases perform as antimicrobials across target sites and strains remains poorly explored. Here, we address this knowledge gap by systematically interrogating the use of CRISPR antimicrobials using multidrug-resistant and hypervirulent strains of Klebsiella pneumoniae as models. Comparing different Cas nucleases, DNA-targeting nucleases outperformed RNA-targeting nucleases based on the tested targets. Focusing on AsCas12a that exhibited robust targeting across differ
СтатьяПоддержка исследования: вне правительства СШАПоиск полного текста в очередиПеревод пока не подготовлен
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Recent advances in genome editing technologies have enabled transformative therapeutic strategies for hematological disorders. Efficient implementation of these approaches requires reliable delivery of genome editing components into primary hematopoietic stem and progenitor cells (HSPCs), which are particularly sensitive and resistant to conventional transfection methods. Electroporation has emerged as the most widely used strategy for ex vivo delivery of genome editing reagents into CD34⁺ hematopoietic cells. Genome editing tools can be delivered in multiple formats, including plasmid DNA, me
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Effective control of genetically diverse pathogens necessitates rapid and accurate diagnostics, as their genomic variability undermines assay reliability and complicates public health interventions. Herein, we introduce a CRISPR-Cas12a-based molecular diagnostic platform integrating robust in silico crRNA design via our CrispHunter pipeline with a high-performance detection module featuring structure-optimized hairpin probes. We validated this approach using Burkholderia pseudomallei, whose high pathogenicity, genetic diversity, and diagnostic evasion exemplify the challenges of detecting hete
СтатьяПолный текст не найденПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.
Heavy metal accumulation increases rapidly in the environment due to anthropogenic activities and industrialization. The leather and surgical industry produces many contaminants containing heavy metals. Cadmium, a prominent contaminant, is linked to severe health risks, notably kidney and liver damage, especially among individuals exposed to contaminated wastewater. This study aims to leverage the natural cadmium resistance mechanisms in bacteria for bioaccumulation purposes. The industrial wastewater samples, characterized by an alarming cadmium concentration of 29.6 ppm, 52 ppm, and 76.4 ppm
СтатьяПоиск полного текста в очередиПеревод в очереди
Обработка статьи · этапы, ошибки и управление
Загрузка состояния…
Ошибки и ограничения
История · было → стало
Состояние обновляется каждые 5 секунд, пока блок открыт. Процент показывается только там, где известен объём работы. Пауза останавливает продолжение этапа; текущий запрос к источнику может завершиться.